亞硒酸鹽增菌培養基的原理及使用注意事項

一、試驗原理：

本培養基主要用于增殖標本中的沙門(mén)氏菌。其中，胰蛋白胨提供碳源和氮源，滿(mǎn)足細菌生長(cháng)的需求；乳糖是可發(fā)酵的糖類(lèi)；亞硒酸氫鈉對革蘭氏陰性桿菌具有毒性，抑制不發(fā)酵乳糖的革蘭氏陽(yáng)性菌和非沙門(mén)氏菌的大多數革蘭氏陰性腸道菌；但大腸桿菌等細菌能使乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸，進(jìn)而中和因亞硒酸鹽被細菌還原而產(chǎn)生的堿。磷酸鹽是緩沖劑，保持培養基PH穩定，有利腸道致病菌的生長(cháng)繁殖。

二、試驗結果判斷：

質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養18-24h結果如下：  

不同菌種在亞硒酸鹽增菌液中培養的結果

三、使用方法：

（1）按說(shuō)明書(shū)稱(chēng)取適量干粉，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝至無(wú)菌試管或三角瓶，備用。注：無(wú)需高壓滅菌。

（2）污水：取200ml污水，用滅菌濾膜進(jìn)行抽濾。用100ml二倍濃度SF增菌液把濾膜上截留的雜質(zhì)洗脫到滅菌三角瓶?jì)�，充分搖勻。

污泥：用滅菌匙取污泥20g，放入滅菌容器內，加入200ml滅菌水，充分混勻，制成1：10混懸液，搖勻。加100ml至裝有100ml二倍濃度SF增菌液的已滅菌的三角瓶?jì)�，搖勻。

（3）將已接種的三角瓶放入恒溫培養箱中，36±1℃培養18—24h。

四、注意事項：

（1）亞硒酸鹽具有致畸毒性，使用時(shí)應特別注意。

（2）此培養基不得高壓滅菌，也不得用較長(cháng)時(shí)間的流通蒸汽滅菌或較長(cháng)時(shí)間的煮沸滅菌。制成的培養基應貯存于4℃冰箱。

（3）此培養基中的蛋白胨品種很重要，因此無(wú)論國產(chǎn)或國外蛋白胨在使用前必須先作細菌學(xué)檢測。國產(chǎn)蛋白胨必須做到每批檢測。

（4）Oxiod手冊還介紹用甘露醇代替乳糖，用于分離傷寒沙門(mén)氏菌及乙型副傷寒沙門(mén)氏菌。Hobbs等比較含乳糖和含甘露醇兩組亞硒酸鹽增菌培養基，在38份傷寒陽(yáng)性糞便中，由含甘露醇組分離出32例陽(yáng)性，而含乳糖組只有5例陽(yáng)性，顯示甘露醇對分離傷寒沙門(mén)氏菌有高度選擇性。

（5）糞便標本接種量約占培養基體積的1%，或將含有糞便的棉拭子插入培養基中，尿液標本可等量加入雙倍濃度增菌液中。增菌時(shí)間應根據標本污染情況而定，污染嚴重的增菌在18小時(shí)以?xún)�，反之可適當延長(cháng)增菌時(shí)間，但不得超過(guò)24h，即轉種于選擇性分離培養基。因延長(cháng)增菌時(shí)間可使大腸菌群迅速生長(cháng)繁殖，影響沙門(mén)氏菌檢出。

相關(guān)產(chǎn)品：

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