用途:用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(GB4789.28-2013,GB4789.4-2010,SN/T2206.1-2008和SN0170-92,ISO標準)。
原理:蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源和維生素,滿(mǎn)足細菌生長(cháng)的需求;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;碳酸鈣能中和細菌產(chǎn)酸及吸收有毒的代謝產(chǎn)物;硫代硫酸鈉和四硫磺酸鈉結合可抑制腸道共生菌(四硫磺酸鈉是在培養基加入碘和碘化鉀時(shí)形成),而具有四硫磺酸鈉還原酶的細菌能在此培養基中繁殖;膽鹽和煌綠可抑制大腸群菌和其它革蘭氏陽(yáng)性細菌。
操作步驟:
1、制備質(zhì)控菌液。
2、接種
2.1混合菌的接種
在裝有待測培養基的試管中接種10-100CFU的目標菌,并接種1000-5000CFU的非目標菌,接種總量1ml,同時(shí)接種兩個(gè)平行管,混勻。同時(shí)分別將目標菌菌懸液(與試管接種同一稀釋度)和非目標菌菌懸液(比試管接種小10-100倍稀釋度)1ml傾注平板,接種兩個(gè)平板,作接種量計數用,42±1℃培養18-24小時(shí)。
2.2非目標菌接種
在裝有待測培養基的試管中接種1000-5000CFU的非目標菌,接種量1ml,同時(shí)接種兩個(gè)平行管,混勻,42±1℃培養18-24小時(shí)。
3、培養液的接種
3.1混合菌培養液的接種
用10μL接種環(huán)取1環(huán)經(jīng)培養后的混合菌培養液,換線(xiàn)接種到XLD上,每管接種一個(gè)平板,36±1℃培養18-24小時(shí)。
3.2非目標菌培養液的接種
吸取10μL經(jīng)培養后的非目標菌培養液,均勻涂布接種到TSA上,每管接種一個(gè)平板。也可使用傾注法進(jìn)行接種,36±1℃培養18-24小時(shí)。
4、記錄實(shí)驗結果
目標菌在選擇性平板上的菌落應>10CFU,則表示待測液提培養基的生長(cháng)率良好;非目標菌在非選擇性平板上的菌落<100CFU,則表示待測液體培養基的選擇性為良好。
微生物試驗:
接種以下質(zhì)控菌株,在42±1℃培養18-24小時(shí):
四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)微生物質(zhì)控結果
a:傷寒沙門(mén)氏菌,b: 鼠傷寒沙門(mén)氏菌,c: 大腸埃希氏菌,d:金黃色葡萄球菌,e:空白對照
方法的局限性
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品:
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