乳糖蛋白胨培養液的應用原理及注意事項

乳糖蛋白胨培養液是國標規定的用于水源水中總大腸菌群的測定的培養基。配成的乳糖蛋白胨培養液呈澄清透明的紫色（下圖左一），它適用于大腸菌群，糞大腸菌群，大腸桿菌的測定。下面我們來(lái)介紹一下乳糖蛋白胨培養基的應用原理和注意事項。

基本原理

乳糖蛋白胨培養基里富含蛋白胨，其主要作用即為給菌株提供必需的氮源和礦物質(zhì)；乳糖成分是為大腸菌群的發(fā)酵提供可發(fā)酵糖類(lèi)；氯化鈉的添加量為5%，主要是為了維持滲透壓的平衡；溴甲酚紫為pH指示劑，酸性呈黃色，堿性呈紫色。因此，能夠發(fā)酵產(chǎn)酸的細菌的培養液變黃，如果并有產(chǎn)氣者則可在小倒管里看到明顯的氣泡；反之，不產(chǎn)酸的細菌培養后液體呈紫色，不產(chǎn)氣的在小倒管里收集不到氣體

例如：大腸桿菌（下圖右一）能夠發(fā)酵培養基中的乳糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣，因此發(fā)酵后液體變黃小倒管含有氣體,輕搖發(fā)酵管也會(huì )有小氣泡上浮。

再如：鼠傷寒沙門(mén)氏菌（下圖中間）不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，因此發(fā)酵后發(fā)酵管底部有沉淀但是液體顏色仍為紫色并無(wú)氣體。

試驗注意事項

1、本品中需要115℃下高壓滅菌20min，這區別大多數培養基121℃高壓滅菌15min的滅菌條件。這是因為，本品中含有乳糖，121℃滅菌會(huì )使乳糖降解，碳化。

2、試驗對于接種量要求10-100CfU，若接種量過(guò)高，培養液應加倍成分。這是由于樣品的量大的情況下，培養液稀釋大，各種成分的相對濃度就會(huì )不足，就不能滿(mǎn)足細菌的生長(cháng)要求，存在實(shí)驗失敗的概率。因此，合理調整樣品量和營(yíng)養液濃度的比例需要反復實(shí)驗和多組對照。

常見(jiàn)問(wèn)題

1、 配方中的乳糖可否用葡萄糖代替？

答：不能。因為葡萄糖經(jīng)細菌發(fā)酵產(chǎn)酸過(guò)多會(huì )使pH達到4.5，易導致大腸桿菌死亡。

2、 水源水中總大腸菌群的測定能否用其它培養基代替乳糖蛋白胨培養液？

答：不建議。這是因為飲用水中雜菌較少，而一些大腸菌群檢驗培養基中經(jīng)常使用膽鹽．洗衣粉、十二烷基硫酸鈉．煌綠、龍膽紫，孔雀綠等抑菌劑。抑菌劑可抑制樣品中的一些雜菌，而有利于大腸菌群的生長(cháng)和挑選，但對大腸菌群中的某些菌株有時(shí)也產(chǎn)生一些抑制作用。

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