VP試驗的試驗原理、操作步驟及注意事項

一、實(shí)驗原理：

某些細菌分解葡萄糖生成丙酮酸，丙酮酸可進(jìn)一步脫羧生成乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在堿性環(huán)境下被氧化成為二乙酰，后者與蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用，生成紅色的胍縮二乙酰而呈現紅色，為VP試驗陽(yáng)性。若培養基中胍基含量少，可加入少量含胍基的化合物如肌酸肌酐等（本試驗加入α萘酚）可以加速其反應。

二、試劑與器材：

1、菌種：大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣腸桿菌。

2、培養基：葡萄糖蛋白胨水。

3、試劑：VP試液甲液（6%α萘酚酒精溶液）和乙液（40%KOH溶液）

三、操作步驟：

Barritt法：將大腸埃希氏菌和產(chǎn)氣腸桿菌分別接種于葡萄糖蛋白胨水中，35℃培養24h~48h，于培養物中先加入VP試液甲液（6%α萘酚酒精溶液）6滴，搖勻，再加入乙液（40%KOH溶液）2滴，搖勻，觀(guān)察結果。

四、試驗結果：

如立即于數分鐘內出現紅色反應者為陽(yáng)性；若不出現紅色反應，可將試管置35℃孵育4h后再行觀(guān)察，仍無(wú)紅色出現者為陰性。本試驗大腸埃希氏菌為陰性、產(chǎn)氣腸桿菌為陽(yáng)性。

五、注意事項：

滴加VP試劑甲液和乙液后需搖勻，靜置10min后才能看到紅色化合物出現。

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