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一、簡(jiǎn)介：
支原體的大小為0.1～0.3um，可通過(guò)濾菌器，常給細胞培養工作帶來(lái)污染的麻煩。菌落�。ㄖ睆�0.1-1.0mm），在固體培養基表面呈特有的"油煎蛋"狀。無(wú)細胞壁，不能維持固定的形態(tài)而呈現多形性，對滲透壓敏感，對抑制細胞壁合成的抗生素不敏感。革蘭氏染色不易著(zhù)色，故常用Giemsa染色法將其染成淡紫色。細胞膜中膽固醇含量較多，約占36%，對保持細胞膜的完整性具有一定作用。細胞膜含甾醇，比其他原核生物的膜更堅韌。凡能作用于膽固醇的物質(zhì)（如兩性霉素B、皂素等）均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。
支原體基因組為一環(huán)狀以雙鏈DNA，分子量�。▋H有大腸桿菌的五分之一），合成與代謝很有限。
肺炎支原體的一端有一種特殊的末端結構（terminal structure），能使支原體粘附于呼吸道粘膜上皮細胞表面，與致病性有關(guān)。
一般能分解葡萄糖的支原體則不能利用精氨酸，能利用精氨酸的則不能分解葡萄糖，據此可將支原體分為兩類(lèi)。解脲支原體不能利用葡萄糖或精氨酸，但可利用尿素作能源。
各種支原體都有特異的表面抗原結構，很少有交叉反應，具有型特異性。應用生長(cháng)抑制試驗（Growth inhibition test,GIT）、代謝抑制試驗（Metabolic inhibition test,MIT）等可鑒定支原抗原，進(jìn)行分型。
它廣泛分布于自然界，有80余種。與人類(lèi)有關(guān)的支原體有肺炎支原體（M-pneumonie，Mp）、人型支原體（UU 分解尿素支原體）和生殖器支原體（M.genitalium，MG）等。
肺炎支原體引起肺炎�，F已從人類(lèi)泌尿生殖道分離出來(lái)7種支原體，其中分離率較高而與泌尿生殖道疾病有關(guān)，是解脲支原體，其次是人型支原體。人型支原體（M.humenis，MH）、解脲支原體（Ureaplasma urealyticum，UU）和生殖器支原體（M.genitalium，MG）都會(huì )引起泌尿生殖道感染。
自然界中廣泛存在絕大多數生長(cháng)需膽固醇，在遺傳上與細菌無(wú)關(guān)，且無(wú)論在什么條件下也不能變成細菌菌落較小，0.1～0.3mm。
培養條件：
營(yíng)養要求比一般細菌高，除基礎營(yíng)養物質(zhì)外還需加入10～20%人或動(dòng)物血清以提供支原體所需的膽固醇。最適pH7.8～8.0之間，低于7.0則死亡，但解脲支原體最適pH6.0～6.5。
大多數兼性厭氧，有些菌株在初分離時(shí)加入5%CO2生長(cháng)更好。生長(cháng)緩慢，在瓊脂含量較少的固體培養基上孵育2～3天出現典型的“荷包蛋樣”菌落：圓形（直徑10～16um），核心部分較厚，向下長(cháng)入培養基，周邊為一層薄的透明顆粒區。此外，支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養細胞中生長(cháng)。
二、常見(jiàn)問(wèn)題：
1、你好，請問(wèn)我想要根據藥典2010三部做支原體檢測，需要哪些培養基？精氨酸支原體肉湯培養基的作用是什么？ 藥典上說(shuō)用支原體肉湯培養基，想問(wèn)問(wèn)是否帶精氨酸，還有支原體瓊脂培養基是需要含精氨酸嗎？我們是檢測看我們的培養的細胞是不是支原體污染了
答：1) 藥典2010三部做支原體檢測需要支原體半流體培養基和支原體肉湯培養基(或支原體瓊脂培養基)。
作驗證試驗時(shí)：支原體肉湯培養基是用來(lái)培養肺炎支原體，利用葡萄糖變黃，則有肺炎支原體的生長(cháng)，如果要分離，則接種到支原體瓊脂培養基上。
精氨酸支原體肉湯培養基是用來(lái)培養口腔支原體，利用精氨酸變紅，則有口腔支原體的生長(cháng)，如果要分離，則接種到精氨酸支原體瓊脂培養基上。
2)支原體肉湯培養基和支原體瓊脂培養基不含精氨酸。
3）支原體的生長(cháng)現象是觀(guān)察液體是否變色，培養后的液體仍是澄清，不是變混濁生長(cháng)，如果變混濁生長(cháng)，說(shuō)明有細菌污染，正常是抑制細菌生長(cháng)的。
2、想分離支原體。不知如何選擇培養基？
答：首先應確定分離哪種支原體。是利用葡萄糖、精氨酸，還是尿素？
利用葡萄糖的支原體：肺炎支原體----支原體肉湯培養基；
利用精氨酸的支原體：口腔支原體、唾液支原體、人型支原體----精氨酸支原體肉湯培養基；
利用尿素的支原體：T株支原體(解脲支原體)—--解脲支原體培養基
雞毒支原體------改良Frey培養基
用于固體培養時(shí)：以上支原體都可以接種于支原體瓊脂培養基上。
3、改良Frey培養基是直接用于培養支原體嗎？
答：用于培養滑液支原體及其他禽支原體用。
4、那如果有支原體的話(huà)是不是改良Frey培養基液體會(huì )變色呢？
答：是的，改良Frey培養基中含有葡萄糖和苯酚紅，當支原體利用葡萄糖時(shí)會(huì )產(chǎn)酸，使pH值下降，溶液顏色變黃，且溶液是澄清的。
5、我們是用來(lái)培養山羊支原體的，一直沒(méi)培養出來(lái)
答：可能培養條件不夠，例血清質(zhì)量不好；CO2濃度為5%-10%、N2濃度為95%時(shí)生長(cháng)良好。
6、你好，我剛才在你們網(wǎng)站搜支原體培養基，發(fā)現有多種，解脲支原體培養基100ml 600元，但是支原體培養基礎250g300元。用支原體培養基礎可以培養解脲脲原體嗎。
答：可以的；我們的解脲支原體培養基是生產(chǎn)好的成品培養基，可直接使用。
7、您好，我想問(wèn)一下，我配的培養基養支原體泛粉紅是什么原因？
答：培養基含有苯酚紅，用來(lái)觀(guān)察支原體是否生長(cháng)？若變色且溶液是澄清的，可以判為有支原體生長(cháng)。
8、請問(wèn)您那里有支原體培養基的平板嗎？
答：建議你們自己制作，因為培養時(shí)間長(cháng)，平板易失水。
9、你好，我們公司最近做支原體檢測，PCR法，但是藥典方法也想做一下看到藥典的支原體檢測方法，看到你家有支原體肉湯培養基，想問(wèn)一下，你們公司是否針對你們的產(chǎn)品進(jìn)行過(guò)支原體肉湯培養基的靈敏度檢測同時(shí)，以前定的培養基都是北京中檢所指定的，但是他們沒(méi)有支原體肉湯培養基，但是有其他的針對相關(guān)支原體的培養基。
答：做過(guò)靈敏度試驗，肺炎支原體達到10-8變色單位，口腔支原體達到10-4變色單位。
10、咨詢(xún)一下，支原體肉湯培養基針對的支原體有哪幾種？還是所有支原體均可培養？
答：利用葡萄糖的支原體，例肺炎支原體等。
11、支原體一般培養一般需要多長(cháng)時(shí)間？
答：支原體培養的時(shí)間比較長(cháng)，生長(cháng)快的T株支原體約需培養1-3天。中等生長(cháng)的約需7-14天，慢的約需21-30天。
12、想買(mǎi)肺炎支原體培養基，HB7025-3支原體瓊脂培養基，是不是可以培養肺炎支原體呀？
答：HB7025-3 支原體瓊脂培養基，是支原體固體平板培養法，可以培養肺炎支原體和口腔支原體。
13、HB7025-2支原體肉湯培養基用法中“青霉素80萬(wàn)單位”是什么意思，指代不明確
答：青霉素80萬(wàn)單位，是指青霉素的效價(jià)單位而不是重量單位。購買(mǎi)青霉素時(shí)在包裝上都有說(shuō)明。
14、培養雞毒支原體和豬肺炎支原體用哪種培養基比較好？
答：培養雞毒支原體用改良Frey培養基；培養豬肺炎支原體用支原體肉湯培養基或豬支原體培養基。
15、還有與PPLO肉湯配合用的培養基的資料能提供些嗎？我現在需要復蘇和傳代肺炎支原體。
答：復蘇可用sp4葡萄糖肉湯培養基，傳代用sp4葡萄糖瓊脂培養基。
16、問(wèn)一下支原體固體培養基這個(gè)能檢測雞的支原體嗎？
答：可以。
17、想檢測細胞培養過(guò)程中，是否有支原體污染，可以用哪些培養基？
答：有，可以用支原體肉湯培養基和支原體半流體培養基。
18、支原體生長(cháng)培養基顏色有什么變化？
答：支原體肉湯培養基和精氨酸支原體肉湯培養基配方中都含有苯酚紅。若有支原體生長(cháng)時(shí)，會(huì )使培養基pH值下降或上升，所以培養基顏色變黃(支原體肉湯培養基)或變紅(精氨酸支原體肉湯培養基)。
19、支原體培養基基礎這個(gè)含有精氨酸和不含精氨酸的有什么區別，我們想要一種廣譜的支原體培養基，建議是用含精氨酸的還是不含精氨酸的？
答：廣譜支原體培養基就不能用含有苯酚紅的培養基，可以用支原體半流體培養基或支原體瓊脂培養基。
20、支原體培養基基礎是添加馬血清，青霉素那些還是支原體添加劑��？
答：支原體培養基基礎中不含馬血清和青霉素，需在基礎培養基高壓滅菌后添加馬血清和無(wú)菌青霉素溶液。
21、請問(wèn)有支原體的菌株嗎？
答：沒(méi)有。
22、請問(wèn) 您這里有雞毒支原體基礎培養基么？
答：有，改良Frey培養基。
23、我看公司的幾種支原體培養基，成分有所不同，具體怎么回事兒呢？
答：針對不同來(lái)源的支原體，采用不同成份的支原體培養基，這樣有利于不同來(lái)源支原體的生長(cháng)和培養。
24、哪個(gè)是用于牛羊支原體的培養基？
答：可以HB8572-2支原體培養基，中國獸藥標準。
25、你們公司有沒(méi)有檢測禽源疫苗的支原體培養基？
答：有，改良FREY氏培養基。
26、請問(wèn)你們的支原體基礎培養基配好之后能夠鑒別支原體嗎？
答：不能，可以做一些生化鑒定，例葡萄糖、精氨酸、尿素、TTC還原、紅細胞吸附等試驗。
27、有支原體菌落形成圖片嗎 ？
答：
28、我看你們有多種支原體培養基，我不知道該買(mǎi)那種我看其他人做支原體培養，先用液體的，再用固體的。我上次直接買(mǎi)了固體的，我打算培養支原體，需要增菌培養。用液體的，需要買(mǎi)那種？
答：1)支原體肉湯培養基 是用來(lái)培養肺炎支原體，利用葡萄糖變黃，則有肺炎支原體的生長(cháng)，如果要分離，則接種到支原體瓊脂培養基上。精氨酸支原體肉湯培養基是用來(lái)培養口腔支原體，利用精氨酸變紅，則有口腔支原體的生長(cháng)，如果要分離，則接種到精氨酸支原體瓊脂培養基上。
29、你好，你那里有用做支原體生化鑒定的培養基么？
答：有，可以做
1)TTC還原試驗：肺炎支原體菌落呈粉紅色或深紅色；
2）葡萄糖、精氨酸、尿素試驗；
3）3%紅細胞吸附試驗：用雞的紅細胞，其中肺炎支原體、口腔支原體I和III型為吸附，陽(yáng)性。
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
