GB 4789.6-2016 食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗

前 言
本標準代替GB/T4789.6—2003《食品衛生微生物學(xué)檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗》。
本標準與GB/T4789.6—2003相比,主要變化如下:
———標準名稱(chēng)修改為“食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗”;
———增加了術(shù)語(yǔ)和定義、縮略語(yǔ);
———增加了血清學(xué)試驗中H 抗原鑒定;
———增加了PCR確認試驗;
———增加了附錄A;
———修改了設備和材料;
———修改了培養基和試劑;
———修改了檢驗程序;
———修改了血清學(xué)試驗中致瀉大腸埃希氏菌所包括的O 抗原群;
———刪除了腸毒素試驗。埃希氏菌。該菌無(wú)動(dòng)力、不發(fā)生賴(lài)氨酸脫羧反應、不發(fā)酵乳糖,生化反應和抗原結構均近似痢疾志賀氏菌。侵入上皮細胞的關(guān)鍵基因是侵襲性質(zhì)粒上的抗原編碼基因及其調控基因,如ipaH 基因、ipaR 基因(又稱(chēng)為invE 基因)。

4 培養基和試劑
4.1 營(yíng)養肉湯:見(jiàn)A.1。
4.2 腸道菌增菌肉湯:見(jiàn)A.2。
4.3 麥康凱瓊脂(MAC):見(jiàn)A.3。
4.4 伊紅美藍瓊脂(EMB):見(jiàn)A.4。
4.5 三糖鐵(TSI)瓊脂:見(jiàn)A.5。
4.6 蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑:見(jiàn)A.6。
4.7 半固體瓊脂:見(jiàn)A.7。
4.8 尿素瓊脂(pH7.2):見(jiàn)A.8。
4.9 氰化鉀(KCN)培養基:見(jiàn)A.9。
4.10 氧化酶試劑:見(jiàn)A.10。
4.11 革蘭氏染色液:見(jiàn)A.11。
4.12 BHI肉湯:見(jiàn)A.12。
4.13 福爾馬林(含38%~40%甲醛)。
4.14 鑒定試劑盒。
4.15 大腸埃希氏菌診斷血清。
4.16 滅菌去離子水。
4.17 0.85%滅菌生理鹽水。
4.18 TE(pH8.0):見(jiàn)A.13。
4.19 10×PCR反應緩沖液:見(jiàn)A.14。
4.20 25mmol/L MgCl2。
4.21 dNTPs:dATP、dTTP、dGTP、dCTP每種濃度為2.5mmol/L。
4.22 5U/LTaq酶。
4.23 引物。
4.24 50×TAE電泳緩沖液:見(jiàn)A.15。
4.25 瓊脂糖。
4.26 溴化乙錠(EB)或其他核酸染料。
4.27 6×上樣緩沖液:見(jiàn)A.16。
4.28 Marker:分子量包含100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、600bp、700bp、800bp、900bp、1000bp、1500bp條帶。
4.29 致瀉大腸埃希氏菌PCR試劑盒。

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