細菌分解乳糖依靠?jì)煞N酶的作用,一種是β-半乳糖苷酶滲透酶,它位于細胞膜上,可送乳糖分子滲入細胞,另一種β-半乳糖苷酶,亦稱(chēng)乳糖酶,位于細胞內,能使乳糖水解成半乳糖和葡萄糖。
具有上述兩種酶的細菌,能在24-48h發(fā)酵乳糖,而缺乏此兩種酶的細菌,不能分解乳糖。乳糖遲緩發(fā)酵菌只有β-半乳糖苷酶(胞內酶)而缺乏β-半乳糖苷滲透酶,因而乳糖進(jìn)入細胞很慢,需經(jīng)培養基中1%乳糖較長(cháng)時(shí)間的誘導,產(chǎn)生相當數量的滲透酶后,才能較快分解乳糖,故呈現遲緩發(fā)酵現象。
ONPG可迅速進(jìn)入細菌細胞,被β-半乳糖苷酶水解,釋放出黃色的鄰位硝基苯酚(ONP),故而培養基變黃可迅速測知β-半乳糖苷酶的存在。當細菌為遲緩發(fā)酵乳糖時(shí),其分解乳糖的時(shí)間非常長(cháng),常需連續監測3-7天;而培養基中加入ONPG后,遲緩發(fā)酵乳糖的細菌也可在非常短的時(shí)間內監測到,常在2-16h內可以得到陽(yáng)性結果。
因此,用含有ONPG的培養基可以快速鑒定乳糖遲緩發(fā)酵菌。
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