一、試驗原理:
1.三糖鐵瓊脂(TSI)試管中的三糖分別為葡萄糖、乳糖及蔗糖,其中葡萄糖含量少,僅為乳糖或蔗糖的1/10。細菌分解糖類(lèi)時(shí)產(chǎn)酸會(huì )使pH降低,斜面和底層呈黃色:①若細菌只分解葡萄糖而不分解乳糖和蔗糖,因葡萄糖含量較少,所生成的少量酸由于接觸空氣氧化,且細菌生長(cháng)繁殖過(guò)程中利用含氮物質(zhì)生成堿性化合物中和,使斜面部分又變成紅色;底層由于處于缺氧狀態(tài),細菌分解葡萄糖所產(chǎn)生的酸一時(shí)不被氧化而仍保持黃色。②若細菌可以分解葡萄糖、乳糖及蔗糖,產(chǎn)酸多,斜面和底層都呈黃色。③若細菌不能發(fā)酵糖類(lèi),則斜面和底層不變色,呈紅色。
2.細菌分解葡萄糖、乳糖或蔗糖產(chǎn)酸的同時(shí)會(huì )產(chǎn)氣,試管中會(huì )出現斷層。
3.細菌產(chǎn)生硫化氫會(huì )與培養基中的硫酸亞鐵反應生成黑色的硫化鐵,形成黑色區域。
二、試驗結果判斷:
常見(jiàn)的試驗結果有如下幾種:
1. 斜面紅色/底層紅色:不能發(fā)酵葡萄糖、乳糖及蔗糖,是非發(fā)酵菌的特征,如銅綠假單胞菌。
2. 斜面紅色/底層黃色:發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖和蔗糖,是不發(fā)酵乳糖菌的特征,如志賀氏菌。
3. 斜面紅色/底層黃色(部分區域黑色):發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖和蔗糖同時(shí)產(chǎn)生硫化氫,是產(chǎn)硫化氫且不發(fā)酵乳糖菌的特征,如沙門(mén)氏菌、亞利桑那菌、枸櫞酸桿菌和變形桿菌等。
4. 斜面黃色/底層黃色:發(fā)酵葡萄糖、乳糖及蔗糖,是發(fā)酵乳糖的大腸菌群的特征,如大腸桿菌、克雷伯菌屬和腸桿菌屬等。
三、注意事項:
檢驗產(chǎn)硫化氫可疑菌時(shí)應及時(shí)觀(guān)察試驗結果,以免生成的硫化鐵形成黑色區域,遮蓋斜面與底層的顏色影響試驗結果的判斷。
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