氧化酶試紙容易受到空氣中氧、水分等因素影響,保存或操作不當會(huì )導致試驗出現偏差,因此對氧化酶試紙進(jìn)行簡(jiǎn)要介紹。
一、試驗原理:
1.氧化酶(細胞色素氧化酶)是細胞色素呼吸酶系統的終末呼吸酶。具有氧化酶的細菌,首先使細胞色素C氧化,再由氧化型細胞色素C使二甲基對苯二胺氧化,生成有色的醌類(lèi)化合物。氧化酶試紙含有二甲基對苯二胺,通過(guò)顏色反應可以檢測細菌是否含有氧化酶。
二、試驗方法:
1.先將氧化酶試紙用無(wú)菌水浸濕,再用細玻璃棒或一次性接種針挑取單個(gè)菌落涂在試紙上。觀(guān)察顏色反應,藍色為陽(yáng)性,2min內不變色為陰性。
三、注意事項:
1.二甲基對苯二胺易氧化,氧化酶試紙應裝在深色瓶中,并于2-8℃保存。正常情況下氧化酶試紙應為白色,若變色則不宜使用。
2.鐵、鎳鉻絲等金屬可催化二甲基對苯二胺變色,若用其來(lái)挑取菌苔,會(huì )出現假陽(yáng)性,故需要用玻璃棒或一次性接種針。
3.在氧化酶試紙上滴加無(wú)菌水,以剛剛浸濕為宜。若試紙過(guò)濕則會(huì )阻礙空氣與菌苔接觸,從而延長(cháng)了反應時(shí)間,造成假陰性。
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