賴(lài)氨酸、精氨酸、鳥(niǎo)氨酸三種脫羧酶培養基用于細菌的脫羧酶、雙水解酶試驗:取質(zhì)控菌新鮮培養物分別接種于脫羧酶試驗培養基及脫羧酶試驗對照培養基,35℃培養24-48小時(shí)。對照管應為黃色,試驗管呈紫色或紫紅色為陽(yáng)性反應,兩管均呈黃色為陰性反應。
氨基酸脫羧酶試驗是根據有些細菌能產(chǎn)生某種氨基酸脫羧酶,使該種氨基酸脫去羧基,生成胺(如賴(lài)氨酸→尸胺,鳥(niǎo)氨酸→腐胺,精氨酸→精胺),從而使培養基變堿性并通過(guò)指示劑變色來(lái)觀(guān)察。
脫羧酶是適應酶或稱(chēng)誘導酶,對底物有特異性,在無(wú)相對氨基酸的培養基中不產(chǎn)生此酶,并且需要酸性環(huán)境和適宜溫度。故在培養基中加入葡萄糖,使細菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸,以利于脫羧酶的產(chǎn)生。氨基酸的分解是在厭氧條件下進(jìn)行,故在培養基表面加液體石蠟。
由于細菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸,在培養初期培養基和對照培養基呈黃色,繼續培養時(shí),若氨基酸經(jīng)脫羧或水解產(chǎn)生胺類(lèi)則培養基變堿,呈紫色或紫紅色,即為陽(yáng)性反應;如至培養末期培養基如同對照管一樣呈黃色則判為陰性反應。若為陰性反應,此試驗至少應培養4天。
若從培養初期開(kāi)始至培養末期培養基和對照培養基均呈紫色,則說(shuō)明該質(zhì)控菌不能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸,故而不能產(chǎn)生相應的脫羧酶,因此該質(zhì)控菌不適用于氨基酸脫羧酶試驗。
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