熒光實(shí)驗結果觀(guān)察

   日常實(shí)驗中，經(jīng)常會(huì )遇到大腸桿菌需要觀(guān)察熒光的情況。國標4789.38-2012大腸埃希氏菌計數中第二法（VRBA-MUG計數），GB/T5750.12-2006水及水源水中的大腸埃希氏菌檢驗，都需要觀(guān)察熒光，可見(jiàn)熒光結果觀(guān)察的重要性。

   MUG，是4-甲基傘形酮-β-D半乳糖苷的縮寫(xiě)，該物質(zhì)為β-半乳糖苷酶與MUG結合并剪切β-半乳糖苷鍵，釋放熒光顯色團4-甲基傘形酮，在紫外光（λ=366nm）下觀(guān)察，培養物發(fā)出藍色熒光。

   觀(guān)察熒光的條件：

   1）在紫外光為366nm波長(cháng)；

   2）在黑暗的環(huán)境下觀(guān)察，有助于更好地觀(guān)察熒光；

   3）紫外燈燈管最好直接照射在待測平板或試管上，無(wú)玻璃等物品吸收紫外光；

   4）使用空白管、陽(yáng)性菌、陰性菌做對照。

   5）推薦使用簡(jiǎn)易便攜式熒光檢測燈，不但具備以上三個(gè)要求，而且避免了紫外光對人直接照射的情況，對試驗人員有所保護。

   空白產(chǎn)熒光原因分析：

   1）試管或平皿洗刷不干凈所致，試管或平皿中殘留4-甲基傘形酮，會(huì )導致空白有熒光。

   2）觀(guān)察熒光的紫外燈不合適，紫外燈的波長(cháng)雖為366nm，但外側有玻璃燈罩，或者功率太大（瓦數高或燈太亮）均會(huì )影響熒光效果。

   3）試管或平皿本身原因。有些試管或平皿本身由于質(zhì)量原因，在紫外燈下自身就帶有光亮。使用前，可以先拿幾種試管或平皿裝入蒸餾水，在紫外燈下觀(guān)察一下，然后挑取亮度較暗的使用。

   建議：

   建議做熒光試驗時(shí)，采用陽(yáng)性對照菌同時(shí)觀(guān)察，可簡(jiǎn)單明了。

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