摘要
目前藥敏試驗一般采用牛津杯法,其過(guò)程繁瑣,需要專(zhuān)用的陶瓦蓋。本研究采用HB四連式牛津杯替代牛津杯進(jìn)行藥敏試驗,其操作過(guò)程簡(jiǎn)單,可以在一次性平皿中進(jìn)行試驗,節省成本,其效果與牛津杯接近,可以替代牛津杯進(jìn)行藥敏試驗。
試驗方法
1、菌懸液的制備
將菌種接種于營(yíng)養瓊脂斜面上生長(cháng),用生理鹽水將菌苔洗下,震蕩混勻。
2、抗生素溶液的制備
按照《中國藥典》中抗生素濃度標準配制。
3、倒平板及接種
取直徑為90mm、高度為14mm的一次性平皿,注入約15mL加熱融化的培養基,使其在平皿底內均勻攤布,放置在水平臺面上使其凝固,作為底層。另取適量培養基加熱融化后,放冷至48-50℃(芽孢可至60℃),加入適量的菌懸液(能得到清晰的抑菌圈為度),搖勻,再向平皿中注入約5mL,使在底層上均勻攤布,作為菌層(試驗的關(guān)鍵是固體培養基表明平整),放置在水平臺上冷卻。
4、放置HB四連式牛津杯及添加抗生素
HB四連式牛津杯已經(jīng)輻照滅菌,可以直接使用。用無(wú)菌鑷子夾住HB四連式牛津杯正面的凸點(diǎn)(標有“海博生物”的為正面),將其放置在菌層培養基表面上,用壓杯板放置在HB四連式牛津杯10秒左右,使其底部與培養基接觸緊密,防止漏液。對角的2個(gè)小管分別滴入高濃度的抗生素溶液,另一對角的2個(gè)小管分別滴入低濃度的抗生素溶液。
5、培養及檢定
小心平穩的將平皿在規定的條件下培養,然后測量各個(gè)抑菌圈直徑,HB四連式牛津杯產(chǎn)生的抑菌圈直徑與傳統的牛津杯產(chǎn)生的抑菌圈直徑基本一致,說(shuō)明HB四連式牛津杯可以替代傳統牛津杯,如下圖所示。
牛津杯與HB四連式牛津杯產(chǎn)生的抑菌圈
結論
HB四連式牛津杯操作方便簡(jiǎn)單;試驗條件簡(jiǎn)單,可以在一次性平皿中進(jìn)行,不必在陶瓦蓋中進(jìn)行,節省成本;重復性高,穩定性好,產(chǎn)生的抑菌圈直徑與牛津杯直徑很接近。因此可以替代牛津杯來(lái)進(jìn)行藥敏試驗。
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注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
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