細菌鞭毛染色操作方法及注意事項

  由于細菌鞭毛極易從菌體脫落，因此常有客戶(hù)因為染色時(shí)的操作不小心導致染色失敗，無(wú)法觀(guān)察到細菌鞭毛，在此列舉幾條鞭毛染色時(shí)的注意事項。

一、細菌培養物

  1.細菌最好在染色前多傳代幾次，以增強菌的活力，經(jīng)有關(guān)文獻表明，傳代三次  的菌染色效果最好。

  2.染色使用的細菌在培養基上的培養時(shí)間最好在6-8個(gè)小時(shí)，選取幼靈菌的原因是老齡菌的鞭毛極易脫落。

  3.挑取菌落時(shí)最好選取邊緣菌落，因為此處的菌落活動(dòng)能力強容易找到鞭毛。

  4.挑取菌的菌量不宜過(guò)大，寧少勿多，否則菌落重疊不易觀(guān)察。

二、細菌制片

  1.涂片時(shí)玻片必須干凈，染色前用洗衣粉洗凈并在酒精中浸泡24h，用前擦拭干凈后使用。

  2.將菌落輕點(diǎn)在玻片上，傾斜玻片讓菌液自然留下，不要用接種環(huán)涂抹或用力過(guò)猛，以免破壞鞭毛。

  3.挑取菌的時(shí)候盡量不要帶有培養基。

  4.玻片上菌液需自然干燥或在溫箱中烘干。

  5.水洗時(shí)需緩慢沖洗，直接用蒸餾水沖洗染液，不要先傾去染液后再水洗，以免污染背景不易觀(guān)察，沖洗時(shí)要將染液的顏色沖洗干凈否則也會(huì )影響觀(guān)察。

三、鏡檢觀(guān)察

  鏡檢時(shí)先從邊緣開(kāi)始逐漸向中間鏡檢，因為邊緣處菌量小，易觀(guān)察到單菌落，中心處菌易重疊，不易觀(guān)察。

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