1生長(cháng)率
將適量測試菌株的工作培養物接種至固體、半固體和液體培養基中,每種培養基上菌株的生長(cháng)率應達規定的最低限值。
1)定量方法
生長(cháng)率PR的計算: PR = NS/NO
NS:從一個(gè)或多個(gè)待測培養基平板上得到的菌落總數。
N0:從一個(gè)或多個(gè)規定的參考培養基平板上獲得的菌落總數(該菌落總數應≥100cfu )。
要求:非選擇性培養基上目標菌的生長(cháng)率最低應為0.7,該類(lèi)培養基應易于目標菌生長(cháng);選擇性培養基上目標菌的生長(cháng)率最低應為0.1;每平板(或每試管)的接種水平為10CFU~100CFU。
2) 半定量方法
半定量方法采用生態(tài)測量技術(shù)在平板上劃線(xiàn),平板板連續劃線(xiàn)區域得分的總和即為生長(cháng)指數G,G值不應超過(guò)標準規定的允許范圍。
3) 定性方法
定性方法采用劃線(xiàn)法觀(guān)察。
①選擇性
將濃度為104CFU/mL~106CFU/mL的非目標菌工作菌株懸浮液接種至選擇培養基和參考培養基中,培養基的選擇性應達到規定值。
②定量方法
選擇因子SF: SF = DO - DS
DO:能在參考培養基上生長(cháng)至少10個(gè)菌落的最高稀釋度
DS:能在測試培養基上顯示生長(cháng)的最高稀釋度
要求:非目標菌在選擇性培養基上的SF至少為2 ;半定量和定量法中,非目標菌應部分或全部被抑制。
③生理生化特性(選擇性和特異性)
規定培養基的基本特性,使用一套適當的測試菌株對培養基上的目標菌的生理生化特性(菌落形態(tài)、大小等)和非目標菌的被抑制程度進(jìn)行測試。