培養基的使用

培養基的使用

1 瓊脂培養基的融化 

將培養基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高壓鍋中的層流蒸汽）使之融化。經(jīng)過(guò)高壓的培養基應盡量減少重新加熱時(shí)間，融化后避免過(guò)度加熱。融化后應短暫置于室溫中（如2 min）以避免玻璃瓶破碎。 

融化后的培養基放入47℃～50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫(可根據實(shí)際培養基凝固溫度適當提高水浴鍋溫度)，直至使用，培養基達到47℃～50℃的時(shí)間與培養基的品種、體積、數量有關(guān)。融化后的培養基應盡快使用，放置時(shí)間一般不應超過(guò)4 h。未用完的培養基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培養基尤應注意，融化后保溫時(shí)間應盡量縮短，如有特定要求可參考指定的標準。 

傾注到樣品中的培養基溫度應控制在約45℃左右。 

2 培養基的脫氧 

必要時(shí)，將培養基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15 min；加熱時(shí)松開(kāi)容器的蓋子；加熱后蓋緊，并迅速冷卻至使用溫度（如FT培養基）。 

3 添加成分的加入

對熱不穩定的添加成分應在培養基冷卻至47℃～50℃時(shí)再加入。無(wú)菌的添加成分在加入前應先放置到室溫，避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。將加入添加成分的培養基緩慢充分混勻，盡快分裝到待用的容器中。 

4 平板的制備和儲存 

傾注融化的培養基到平皿中，使之在平皿中形成厚度至少為3 mm（直徑90 mm的平皿，通常要加入18 mL～20 mL瓊脂培養基）。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存，或者培養時(shí)間超過(guò)48 h或培養溫度高于40 ℃，則需要傾注更多的培養基。凝固后的培養基應立即使用或存放于暗處和（或）5 ℃±3 ℃冰箱的密封袋中，以防止培養基成分的改變。在平板底部或側邊做好標記，標記的內容包括名稱(chēng)、制備日期和（或）有效期。也可使用適宜的培養基編碼系統進(jìn)行標記。 

將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長(cháng)儲存期限。為了避免冷凝水的產(chǎn)生，平板應冷卻后再裝入袋中。儲存前不要對培養基表面進(jìn)行干燥處理。 

對于采用表面接種形式培養的固體培養基，應先對瓊脂表面進(jìn)行干燥：揭開(kāi)平皿蓋，將平板倒扣于烘箱或培養箱中（溫度設為25 ℃～50 ℃）；或放在有對流的無(wú)菌凈化臺中，直到培養基表面的水滴消失為止。注意不要過(guò)度干燥。商品化的平板瓊脂培養基應按照廠(chǎng)商提供的說(shuō)明使用。

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