免疫學(xué)檢測技術(shù)

一、概述

    抗原與抗體的結合反應是一切免疫測定技術(shù)的最基本原理。在此基礎上結合一些生化或理化方法作為信號顯示或放大系統即可建立免疫測定法，如放射免疫測定法、酶免疫測定法、熒光免疫測定法等。一個(gè)成功的免疫測定法必須具備3個(gè)要素：性能優(yōu)良的抗體、靈敏和專(zhuān)一性的標記物和高效的分離手段。按照是否使用標記物分為標記免疫測定法和非標記免疫測定法，后者又稱(chēng)為經(jīng)典免疫測定法；按反應介質(zhì)分為均相或非均相(免疫復合物需分離后檢測)免疫測定法；按反應狀態(tài)分為平衡態(tài)或非平衡態(tài)免疫測定法。按照標記物種類(lèi)，標記免疫測定法又分為放射性標記測定法和非放射性標記測定法。

目前最常用的免疫學(xué)檢測技術(shù)如下：

（1）放射免疫測定技術(shù)  

（2）酶免疫測定技術(shù)

（3）熒光免疫測定技術(shù)

（4）發(fā)光免疫測定技術(shù)

（5）膠體金免疫測定技術(shù)

二、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)

（一）ELISA的基本原理

 ELISA(Enzyme-Linked immunosorbent assay)的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。這一方法的基本原理如下。

 （1）使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，井保持其免疫活性；

 （2）使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性．又保留酶的活性。

（二）ELISA的類(lèi)型

 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類(lèi)型。

1 雙抗體夾心法測抗原

2 雙抗原夾心法測抗體

3 間接法測抗體

4 競爭法測抗體

5 競爭法測抗原

（三）ELISA的材料與試劑

 完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；酶標記的抗原或抗體（結合物）；酶的底物；陰性對照品和陽(yáng)性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定中）；結合物及標本的稀釋液；洗滌液；酶反應終止液。

1 免疫吸附劑 

2 結合物 

3 酶的底物

4 洗滌液

5 酶反應終止液

6 陽(yáng)性對照品和陰性對照品

7 參考標準品

三、磺胺二甲嘧啶的間接競爭ELISA檢測

（一）人工完全抗原的合成

（二）合成抗原的鑒定

（三）抗體的制備與純化

（四）標準競爭抑制曲線(xiàn)的制作

（五）畜產(chǎn)品中SM2殘留的ELISA檢測

（六）方法評價(jià)

1  特異性

2  靈敏度

3  準確度

4  精確度

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