標準:菌落總數(cfu/cm2):≤30 大腸菌群:(MPN/100cm2)<3
1 采樣時(shí)間: 在消毒后,使用前進(jìn)行采樣。
2 采樣方法(濾紙浸貼法)
將5cm×5cm(25cm2)滅菌濾紙片使用前用無(wú)菌生理鹽水浸濕均勻,使用無(wú)菌鑷子夾住貼在食品接觸面表面(如模具、傳送帶、手等表面),充分接觸停留1分鐘,反轉背面同法操作停留1分鐘,立即投入盛有50mL的滅菌鹽水三角瓶中,充分振搖后,制成原液。
3 檢測方法:按GB4789.1-4789.3執行
3.1菌落總數的檢測
用無(wú)菌吸管取1.0mL原液接種于滅菌平皿內,平行接種兩個(gè)平皿,加入滅菌冷卻至約46℃的營(yíng)養瓊脂約15mL,邊傾注邊搖勻,待瓊脂凝固,反轉平皿置于37℃恒溫箱培養48小時(shí),計數菌落數,用cfu/cm2表示。
菌落總數(cfu/cm2)=平板上菌落平均數×稀釋倍數
3.2大腸菌群的檢測
3.2.1方法:用無(wú)菌吸管取3個(gè)10mL原液分別接種于3個(gè)含10mL雙倍乳糖膽鹽發(fā)酵培養基管內(管內均裝有3.5cm長(cháng)的小倒管);用無(wú)菌吸管取3個(gè)1mL原液,分別接種在3個(gè)含10mL單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養基管內;將原液1:10稀釋后,取3個(gè)1mL,分別接種在3支含10mL單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養基管內。共9支發(fā)酵培養管,置于37℃恒溫箱培養24小時(shí)。若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管均不產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,則可報告大腸菌群陰性。若乳糖膽鹽發(fā)酵管變黃且產(chǎn)氣,要進(jìn)行分離培養。取一接種環(huán)劃種伊紅美藍瓊脂平板,37℃培養24小時(shí),挑取典型菌落,涂片進(jìn)行革蘭氏染色。同時(shí)接種乳糖復發(fā)酵管,置37℃培養24小時(shí),觀(guān)察產(chǎn)氣情況。凡乳糖復發(fā)酵管產(chǎn)氣、革蘭染色為陰性的無(wú)芽孢桿菌,即可報告為大腸菌群陽(yáng)性。
3.2.2結果報告:根據大腸菌群陽(yáng)性管數,查大腸菌群最可能數(MPN)檢索表,降低十倍報告,用MPN/100cm2表示(見(jiàn)GB4789.3-2003)。
4注意事項
4.1若污染不嚴重,大腸菌群檢驗可僅做三管原液檢驗,報告大腸菌群的MPN值即可。
4.2若測定菌落總數接種于平皿內的是原液,因稀釋倍數為1,則直接報告菌落總數的平均值。
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