糖發(fā)酵試驗

 (一)目的要求
1．了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用。
2．掌握通過(guò)糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。
(二)基本原理
糖發(fā)酵試驗是常用的鑒別微生物的生化反應，在腸道細菌的鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類(lèi)作為碳源和能源，但是它們在分解糖類(lèi)物質(zhì)的能力上有很大的差異。有些細菌能分解某種糖產(chǎn)生有機酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫氣、甲烷、二氧化碳等）；有些細菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；傷寒桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能分解乳糖。發(fā)酵培養基含有蛋白胨，指示劑（溴甲酚紫），倒置的德漢氏小管和不同的糖類(lèi)。當發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)，溴甲酚紫指示劑可由紫色（pH6.8）變?yōu)辄S色(pH5.2)。氣體的產(chǎn)生可由倒置的德漢氏試管中有無(wú)氣泡來(lái)證明。如圖16—2。
(三)器材
1．菌種   大腸桿菌，普通變形桿菌斜面各一支。
2．培養基   葡萄糖發(fā)酵培養基試管和乳糖發(fā)酵培養基試管各3支(內裝有倒置的德漢氏小試管)。
3．儀器或其他用具   試管架，接種環(huán)等。
(四)操作步驟
1．用記號筆在各試管外壁上分別標明發(fā)酵培養基名稱(chēng)和所接種的細菌菌名。
2．取葡萄糖發(fā)酵培養基試管3支，分別接入大腸桿菌，普通變形桿菌，第三支不接種，作為照。另取乳糖發(fā)酵培養基試管3支，同樣分別接入大腸桿菌，普通變形桿菌，第三支不接種，作為對照。
在接種后，輕緩搖動(dòng)試管，使其均勻，防止倒置的小管進(jìn)入氣泡。
3．將接種過(guò)和作為對照的6支試管均置37℃培養24~48h。
4．觀(guān)察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無(wú)氣泡。
五、實(shí)驗報告
1．結果
將結果填入下表�！�+”表示產(chǎn)酸或產(chǎn)氣，“-”表示不產(chǎn)酸或不產(chǎn)氣。
糖類(lèi)發(fā)酵 大腸桿菌 普通變形桿菌 對照
葡萄糖發(fā)酵
乳糖發(fā)酵      
2．思考題
假如某種微生物可以有氧代謝葡萄糖，發(fā)酵試驗應該出現什么結果？
  
   

 

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