培養基整體性能的評估

理化指標

理化指標通常由生產(chǎn)廠(chǎng)商通過(guò)對原材料、生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)過(guò)程進(jìn)行質(zhì)控，使用者通常用感官檢查或pH測定進(jìn)行確認。

理化指標包括培養基的色澤，培養基的水分含量，培養基的澄清度，培養基的PH,固體培養基的凝膠程度。

微生物學(xué)指標

培養基對目標菌的促生長(cháng)能力(生長(cháng)率)，培養基對非目標菌的抑制能力(選擇性)，培養基的指示能力(生化特性)。

微生物學(xué)評估方法-
使用一套合適的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試

定量法—培養基生產(chǎn)廠(chǎng)家或對培養基質(zhì)量有特殊要求的實(shí)驗室對培養基質(zhì)控 ；

半定量法—實(shí)驗室對培養基的質(zhì)控；

定性法—實(shí)驗室對培養基的質(zhì)控。

固體培養基的生長(cháng)率測試-定量法

選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌懸液(目標菌)0.1mL，均勻涂布接種于待測平板和參比平板。每一稀釋度接種兩個(gè)平板。并按標準規定的培養條件培養平板。

計算生長(cháng)率PR ： 

PR = NS/N0

PR：生長(cháng)率。

NS：待測培養基平板上得到的菌落總數。

N0：參比培養基平板上獲得的菌落總數(該菌落總數應≥100CFU) 。

質(zhì)控菌株的要求

具典型反應特性的生長(cháng)良好的陽(yáng)性菌株 ；

弱陽(yáng)性菌株（對培養基中選擇劑等試劑敏感性強的菌株）； 

不具有該特性的陰性菌株； 

部分或完全受抑制的菌株；

固體培養基的生長(cháng)率測試半定量法

將質(zhì)控菌株接種到非選擇性肉湯培養過(guò)夜。

用1ul接種環(huán)按圖劃線(xiàn)接種：

計算生長(cháng)指數G：

每條有比較稠密菌落生長(cháng)的劃線(xiàn)則G為1，每個(gè)培養皿上G最大為16。

如果僅一半的線(xiàn)有菌落生長(cháng)，則G為0.5。

如果劃線(xiàn)上沒(méi)有菌落生長(cháng)或生長(cháng)量少于劃線(xiàn)的一半，則G為0。

記錄每個(gè)平板的得分總和便得到G。

固體培養基的生長(cháng)率測試-定性法

將質(zhì)控菌株接種到非選擇性肉湯培養過(guò)夜。

用1ul接種環(huán)取測試菌培養物在測試培養基表面劃平行直線(xiàn)（細菌），或用接種針直接挑取斜面培養物點(diǎn)種接種（霉菌）。并按標準規定的培養條件培養平板。

培養后按以下方法對培養基計分：

0 表示無(wú)生長(cháng)；

1 表示微弱生長(cháng)；

2 表示生長(cháng)良好。

固體培養基生長(cháng)率評價(jià)標準

非選擇性固體培養基和固體計數培養基PR值應不小于0.7；G值應大于6。

選擇性固體培養基PR值一般應不小于0.5，最低應為0.1 。

選擇性計數固體培養基上目標菌的生長(cháng)率一般不小于0.7 。

定性法目標菌得分應為2。

固體培養基選擇性測試-半定量法

將質(zhì)控菌株接種到非選擇性肉湯培養過(guò)夜。

用1μl接種環(huán)取選擇性測試工作菌懸液1環(huán)，在待測培養基表面劃六條平行直線(xiàn)(如圖)，同時(shí)接種兩個(gè)平板，劃線(xiàn)時(shí)可在培養基下面放一個(gè)模板圖，按標準規定的培養條件培養平板。

固體培養基選擇性測試-半定量法

計算G：

每條有比較稠密菌落生長(cháng)的劃線(xiàn)則G為1，每個(gè)培養皿上最多為6分。

如果僅一半的線(xiàn)有菌落生長(cháng)，則G為0.5。

如果劃線(xiàn)上沒(méi)有菌落生長(cháng)或生長(cháng)量少于劃線(xiàn)的一半，則G為0。 

評價(jià)標準：

G應小于6。

固體培養基生化特性測試-定性法

分別觀(guān)察質(zhì)控菌株(包括目標菌和非目標菌)在培養基上形態(tài)、顏色及生化特征。

評價(jià)培養基的指示系統是否正常。

液體培養基測試-半定量法

混合菌接種：在待測液體培養基中接種10~100CFU目標菌，同時(shí)接種1000~5000CFU非目標菌，按標準規定條件培養。

非目標菌接種：在待測液體培養基中分別接種上述非目標菌，按標準規定條件培養。

用10μL接種環(huán)取1環(huán)混合菌接種培養物，劃線(xiàn)接種于特定的選擇性平板上，按標準規定條件培養。

吸取非目標菌接種培養物10μL，以涂布法或傾注法接種于非選擇性平板上(如TSA)，按標準規定條件培養。

評價(jià)標準

目標菌在選擇性平板上的菌落應>10CFU，則生長(cháng)率良好。

非目標菌在非選擇性平板上菌落數應<100CFU，則表示待測培養基選擇性良好。

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