霉菌分類(lèi)鑒定的基本材料

霉菌分類(lèi)鑒定培養基

  霉菌培養時(shí)常因不同的培養基而在生理和形態(tài)方面表現出極大的差異，故描述菌種時(shí)應注明鑒定培養基。最為常用的是察氏瓊脂（Czapek Agar）和馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA），通常青霉、曲霉用察氏瓊脂培養，其他霉菌則應選用PDA。

  青霉和曲霉在察氏瓊脂上顏色和形態(tài)分化較好。通用的察氏培養基有三種：原配方、Dox修改和Thom修改配方。三者的差別在于硝酸鈉添加量分別是3.0 g、3.5 g和2.0 g。盡管Dox氏和Thom氏均稱(chēng)自己修改后的配方青霉、曲霉生長(cháng)良好，重復性高，但國家標準仍以原配方為鑒定培養基。我們認為Dox氏配方可以試用。

  對于鐮刀菌屬的菌種，必要時(shí)要選用六種以上的不同培養基來(lái)分別顯示它的不同培養特征。對有特殊要求的霉菌，培養時(shí)也應滿(mǎn)足其條件，低水活度食品如果醬、糧食中的嗜干霉菌，應使用大量添加蔗糖或食鹽的高滲培養基。如高鹽察氏瓊脂。

  待鑒定菌株的分離和純化常用方法有直接點(diǎn)種法、劃線(xiàn)法、稀釋平板法。稀釋平板

法同常規檢驗，除了培養基用具選擇性的外，還要求每皿中長(cháng)出的霉菌菌落在十個(gè)左右，太多則影響分離效果。另外，如采用傾注法，長(cháng)在瓊脂深處的霉菌發(fā)育不良，無(wú)法觀(guān)察

其菌落特征�？筛挠帽砻嫱坎挤�。此方法手續繁瑣，但所得種類(lèi)較多。直接點(diǎn)種法將食物小顆粒直接種于分離培養基上，25℃培養2 d～3 d后，用接種針挑取孢子或菌絲，轉接于適當的瓊脂斜面上待鑒定。此方法分純效果略遜。劃線(xiàn)法是用無(wú)菌水洗滌樣品，

  用接種環(huán)沾取液體在分離培養基上劃線(xiàn)分離。此法最簡(jiǎn)便，但可能遺落部分菌株。

霉菌分類(lèi)鑒定時(shí)間

  直接采用霉菌和酵母計數后的平板進(jìn)行霉菌分類(lèi)鑒定是可行的。但僅僅培養5 d～7 d時(shí)，菌種的形態(tài)特征不明顯，不容易觀(guān)察。通常于培養7 d～14 d時(shí)鑒定。

霉菌分類(lèi)鑒定染色液

  制片時(shí)染色液是必需的。常用兩種：乳酸品紅染色液（百萬(wàn)分之一酸性品紅的乳酸溶液），染色速度快，尤其是幼齡組織上色快。胞壁組織清晰，適于顯微攝影。

乳酸苯酚棉藍染色液（10 g石炭酸溶于10 mL熱蒸餾水，再加入甘油20 mL、乳酸10 mL，最后，加棉藍cotton blue 0.22 g即成），折光率好，背景微藍，細胞不變形，殺菌防腐防腐，且不易干燥，保持時(shí)間較長(cháng)。1896年Amann氏發(fā)明。

乳酸苯酚棉藍染色液使用效果圖

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