大腸菌群、金黃色葡萄球菌檢驗中常見(jiàn)問(wèn)題分析

大腸菌群

大腸菌群：是只一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏無(wú)芽孢桿菌 。該菌主要來(lái)源于人畜糞便。

檢測該菌的方法主要有MPN法，平板計數法。

     MPN法中主要用到的是LST、BGLB、EC肉湯等。

     平板計數法主要用DC、VRBA等。

在檢測該菌時(shí)易出現的問(wèn)題：

 1、  LST、BGLB、EC等在滅菌時(shí)小倒管中氣泡排不盡。

 2、氣泡不易觀(guān)察。

 3、VRBA、DC平板上菌落特征不易辨認。 

原因： 

  1、在分裝LST、BGLB、EC時(shí)，小倒管中有水柱；此外，高壓滅菌時(shí)，需急排氣，滅菌后迅速冷卻。

  2、觀(guān)察氣泡時(shí)，要對光傾斜試管，使小倒管緊貼在試管壁上，便于觀(guān)察。

  3、熟悉大腸桿、大腸菌群在上述平板上的特征,必要可做一些陽(yáng)性的對照。有些食物殘渣會(huì )影響觀(guān)察結果，這樣需要我們在培養前仔細觀(guān)察平板的狀態(tài)，大的食物殘渣可以做一些標記。

金黃色葡萄球菌 

金黃色葡萄球菌：是人類(lèi)化膿感染中最常見(jiàn)的病原菌，可引起局部化膿感染，也可引起肺炎、敗血癥等，其毒性的強弱取決于產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶，例溶血素酶、殺白細胞素、血漿凝固酶、脫氧核糖核酸酶。

B-P瓊脂上金黃色葡萄球菌有黑色的菌落中心，周?chē)�有半透明的卵磷脂沉淀環(huán)。

甘露醇卵黃瓊脂上的特征是菌落黃色，周?chē)�也有卵磷脂沉淀環(huán)。 

甘露醇高鹽瓊脂上的菌落特征與甘露醇卵黃瓊脂上的菌落特征相同，不過(guò)，菌落周?chē)鷽](méi)有卵磷脂沉淀環(huán)。

金黃色葡萄球菌在B-P上的菌落特征

檢樣中常見(jiàn)的問(wèn)題：

1、平板的狀態(tài)：透明、有絮狀物。

2、凝固酶實(shí)驗的觀(guān)察。

原因：

1、不同的廠(chǎng)家的培養基平板制好后的狀態(tài)有所不同，主要取決于亞碲酸鉀卵黃增菌液的不同。我們公司采用的雞蛋是山雞蛋，卵磷脂含量較高，因此制備好的平板一般透明度較好，接種金黃色葡萄球菌后，菌落特征較易觀(guān)察。

2、在添加亞碲酸鉀卵黃增菌液時(shí)，溫度的掌握，不宜太高，過(guò)高易使卵黃變性，也不應太低，太低瓊脂易凝固。

3、將金黃色葡萄球菌接種到兔血漿上后，每半小時(shí)觀(guān)察一次，觀(guān)察凝固時(shí)，將血漿輕輕傾斜或慢慢倒置，如有流動(dòng)，既證明沒(méi)有凝固。如若不明顯，可補做DNA酶實(shí)驗。

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