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最嚴格的厭氧菌 ：常溫催化除氧式或焦性沒(méi)石子酸除氧式。
生長(cháng)最適溫度：28 ℃ ～37 ℃ 酸堿度：pH為6.8—7.6，產(chǎn)毒的最適pH為7.8 ~8.2
產(chǎn)毒培養溫度：各型菌產(chǎn)毒的最適培養溫度不完全相同。C、D型溫度高些為宜，35℃ 培養3d即可，而E型菌低溫度長(cháng)時(shí)間培養效果較好， 25℃ 培養7~10d。為兼顧其它型，統一采用30℃培養 5 ~10d ， pH7.8 。
菌株分離培養溫度：35℃ 48h ， pH為7.5 。
對營(yíng)養要求不高 ：在普通培養基上都能生長(cháng)。
增菌產(chǎn)毒培養基：即適于肉毒梭菌發(fā)芽、繁殖，又適于產(chǎn)生毒素（庖肉培養基）。呈均勻混蝕生長(cháng)，肉渣可被A、B和F型菌消化，并發(fā)黑，產(chǎn)生腐敗惡臭味，產(chǎn)生大量氣體。
分離鑒定培養基：卵黃瓊脂平板是較好的培養基，由于肉毒梭菌（除G型）產(chǎn)生脂肪酶，分解卵黃中的脂肪，在卵黃瓊脂平板上形成的菌落及其周?chē)囵B基表面在斜光照射下可見(jiàn)到虹彩薄層，此現象，除A型諾氏梭菌及生孢梭菌外，屬于肉毒梭菌所特有，有一定的鑒別作用。菌落形態(tài)：類(lèi)圓形，邊緣不整，直徑大約3毫米。菌落突出平板表面，灰白色，表面一般比較光滑也有的呈顆粒狀，菌落底部及周?chē)纬筛视投サ某恋砣闈岘h(huán)。如果平板表面濕潤則菌落界線(xiàn)不明顯，向外擴散，常常擴散成菌苔。也可形成絨毛網(wǎng)狀菌落。血瓊脂平板，血液具有降低氧化還原電位的作用，能促進(jìn)肉毒梭菌的生長(cháng)。菌落周?chē)霈F大而透明的溶血環(huán)（除G型） 。
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