沙門(mén)氏菌生化鑒定操作及反應理

   沙門(mén)氏菌是一群形態(tài)、培養、生化反應和抗原構造相類(lèi)似的革蘭氏陰性桿菌，種類(lèi)繁多。已發(fā)現2000多個(gè)種（或血型）。它是革蘭氏陰性桿菌，需氧或兼性厭氧，最適生長(cháng)溫度為35～37℃，最適pH值為6.8～7.8。不分解乳糖（亞利桑那菌除外）。分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門(mén)氏菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣）。多數產(chǎn)生H2S，不產(chǎn)生靛基質(zhì)，不液化明膠，不分解尿素，不產(chǎn)生乙酰甲基甲醇，多數能利用枸櫞酸鹽，能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在氰化鉀培養基上不生長(cháng)。

三糖鐵試驗

實(shí)驗步驟：將被檢菌穿刺接種三糖鐵瓊脂，36±1℃培養18h～24h后，觀(guān)察結果。

 沙門(mén)氏菌反應為：斜面產(chǎn)堿，底層產(chǎn)酸，產(chǎn)H2S。

反應原理：沙門(mén)氏菌不發(fā)酵乳糖，使斜面呈紅色，發(fā)酵葡萄糖，而使底層呈黃色，且能分解培養基中的硫氨基酸，生成H2S，H2S遇鉛或鐵離子形成黑色的硫化鉛或硫化鐵沉淀物。

尿素酶試驗

實(shí)驗步驟：將被檢菌接種到尿素酶肉湯中，于36±1℃培養18-24h，觀(guān)察結果。變紅色為陽(yáng)性，不變色或者變黃色為陰性。

沙門(mén)氏菌為陰性。

反應原理：細菌能產(chǎn)生尿素酶，分解尿素形成氨，使培養基變堿，酚紅指示劑隨之變紅色。

靛基質(zhì)(吲哚)試驗

實(shí)驗步驟：將被檢菌接種到蛋白胨水培養基中，36±1℃培養18h～24h后，沿試管壁滴加數滴吲哚試劑于培養物液面，觀(guān)察結果。

沙門(mén)氏菌為陰性。

反應原理：細菌具有色氨酸酶，能分解培養基中的色氨酸，生成吲哚，吲哚與試劑對二甲氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈紅色。

ONPG試驗

實(shí)驗步驟：將被檢菌接種于ONPG生化管肉湯中，于36±1℃培養18-24h，觀(guān)察結果。溶液變黃色為陽(yáng)性，不變色為陰性。

沙門(mén)氏菌ONPG試驗為陰性。    

反應原理：沙門(mén)氏菌具有β半乳糖苷酶，可分解鄰-硝基β半乳糖苷（ONPG），生成黃色的鄰-硝基酚。

賴(lài)氨酸脫羧酶試驗

實(shí)驗步驟：將被檢菌接種到賴(lài)氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對照生化管中，于36±1℃培養18h～24h后，觀(guān)察結果。賴(lài)氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對照均變黃為陰性，賴(lài)氨酸脫羧酶肉湯變紫，氨基酸脫羧酶對照變黃為陽(yáng)性。

沙門(mén)氏菌為陽(yáng)性。

反應原理：當細菌利用碳源丙二酸鹽時(shí)，可將分解為碳酸鈉，使培養基變堿性，使指示劑由綠色變?yōu)樗{色。

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