一、采樣用物品
1.食品(包括固體和液體)采集:滅菌塑料袋20個(gè)、廣口瓶4個(gè)、吸管10支以上、刀、剪、勺、鑷子、夾子等 。
2.涂抹樣品采集:滅菌生理鹽水試管(5ml)至少20支,棉拭子若干包,有條件的單位應配備選擇性培養基。
3.便樣采集:采便管、運送培養基各20支以上。
4.患者嘔吐物采集:無(wú)菌平皿和特殊采樣棉球各20個(gè)以上。
5.血樣采集:一次性注射器、滅菌試管各10支以上。
6 .保藏樣品的冷藏設備。
7.防污染的工作服或隔離衣、帽、口罩、手套、靴子等。
8.其他必備物品:75%醫用酒精、酒精燈、酒精棉球、洗耳球 、打火機、記號筆等。
二、培養基準備
1.C-B保存液:保存病原菌。
2.亞硒酸鹽增菌液:培養沙門(mén)菌。
3.普通肉湯:培養金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌。
4.1%葡萄糖肉湯:培養鏈球菌。
5.7.5%NaCl肉湯:培養金黃色葡萄球菌。
6.嗜鹽增菌液:培養副溶血性弧菌。
7.堿性蛋白胨水:培養霍亂弧菌。
8.腸道增菌液:培養致瀉大腸埃希菌。
9.GN增菌液;培養志賀菌、變形桿菌。
10.LB1增菌液:培養單核細胞增生李斯特氏菌。
11.硫乙醇酸鹽培養液:培養產(chǎn)氣莢膜梭菌。
12.布氏肉湯:培養空腸彎曲菌。
以上裝備應不少于兩套,分別由專(zhuān)人負責準備和管理。消耗性物品用后應不遲于次日及時(shí)補充齊全。對采樣箱物品儲備情況應堅持每月例行檢查,凡未經(jīng)使用的滅菌試管、培養基和采便管等無(wú)菌物品應至少每月更換一次,以確保達到無(wú)菌要求。
三、現場(chǎng)樣品的采集
現場(chǎng)調查人員應盡一切努力及時(shí)完成,對中毒發(fā)生現場(chǎng)食物中毒各種樣品采集工作,不能及時(shí)趕到現場(chǎng)采樣或者采樣不全面或采樣方法不正確均可能直接影響致病物質(zhì)的查明。各種食物中毒的采樣各有側重點(diǎn),應根據初步掌握的食物中毒性質(zhì)確定采樣的重點(diǎn),一般根據病人出現的臨床癥狀和流行病學(xué)特點(diǎn)和衛生學(xué)調查結果, 初步確定進(jìn)行現場(chǎng)或實(shí)驗室檢驗的項目,有針對性采集現場(chǎng)樣品,以便能夠明確找到中毒食品。
食品樣品采集:
1.盡量采取中毒患者食用后的剩余食品。
2.無(wú)直接剩余食品時(shí),采集可疑中毒食品的包裝或者用滅菌生理鹽水洗滌盛過(guò)可疑中毒食品的容器,取洗滌液;
3.采集同一加工場(chǎng)所加工的其它直接入口食品。
4.必要時(shí)采集半成品或原料。
涂抹樣品采集:包括生產(chǎn)設備上的殘留物,食品加工工具、用具、炊具 及食品容器、餐飲具、抹布、操作人員手等可能直接或間接接觸可疑中毒食品的物品表面進(jìn)行涂抹采樣,即用無(wú)菌棉拭子浸沾生理鹽水,反復抹擦表面,然后將棉拭子置于鹽水管中。也可用刀刮物品表面取樣。
大便樣品采集:大便樣品對診斷細菌性食物中毒非常重要,尤其是在無(wú)法采集到剩余食品時(shí),主要靠大便樣品明確診斷。
采集大便樣品應注意:
1. 必須用采便管采集腹瀉病人大便,若讓中毒病人自行留便可能影響致病菌的檢出率;
2. 無(wú)論中毒病人是否已經(jīng)服藥,均應進(jìn)行大便采集。有人認為中毒病人服藥后再采集大便沒(méi)有意義,實(shí)際經(jīng)驗表明,病人服藥后仍可檢出致病菌,只是致病菌檢出率可能減低。決不能因為病人已經(jīng)服藥而放棄大便采集,貽誤明確診斷的機會(huì )。
3. 應采集嚴重腹瀉中毒病人的大便,對一起較大規模的食物中毒事件一般至少采集20名病人的大便。
嘔吐物采集:出現嘔吐病人時(shí),應盡量多采集病人嘔吐物,嘔吐物已被處理掉時(shí),涂抹被嘔吐物污染的物品。
血液采集 :懷疑感染型細菌性食物中毒時(shí),采集中毒病人急性期(3天內)和恢復期(2周左右)靜脈血3ml,至少采集5名病人,同時(shí)采集正常人靜脈血作為對照,觀(guān)察抗體效價(jià)的變化,以便明確致病菌。
食品加工人員帶菌情況采樣:當懷疑細菌性食物中毒時(shí),廚師或者其他食品加工人員是常見(jiàn)的污染源之一,應根據對食品加工人員帶菌情況調查結果進(jìn)行采樣,可用采便管對廚師進(jìn)行采便,涂抹食品加工人員的手、鼻、咽和有感染灶的皮膚等。
水樣采集:當懷疑水污染事故時(shí),應采集水樣。
其它采樣:食物中毒的情況復雜多變,根據實(shí)際需要可以采集含有或可能含有有毒物質(zhì)的各種物品 。
四、樣品保管與送檢
1.樣品采集后登記好詳細信息,對每個(gè)樣品作唯一標志,以防錯亂;并嚴密封閉包裝,置冰壺冷藏,應在4小時(shí)內送至實(shí)驗室。
2.樣品送檢應附詳細送檢單,填明樣品的名稱(chēng)、來(lái)源、件數、重量、采樣的條件、時(shí)間、送檢時(shí)間、檢驗項目、受理編號、送樣人等。并向檢驗人員說(shuō)明中毒情況。
3.檢驗人員接到樣品必須簽字,注明接到時(shí)間,并立即進(jìn)行檢驗。
4.如發(fā)現采樣的條件(容器或采樣) 可能影響結果時(shí),應在檢驗報告上注明。
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