放線(xiàn)菌的形態(tài)及其菌落特征的觀(guān)察

一、目的

放線(xiàn)菌是介丁細菌與真菌之間的一類(lèi)微生物，其菌體為絲狀體，伸人培養基內的為基內菌絲，也稱(chēng)營(yíng)養菌絲，生長(cháng)在培養基表面的為氣生菌絲。氣生菌絲的上面可分化形成孢子絲，有各種形狀，如直立、波浪、螺旋等。孢子絲可進(jìn)一步分化形成孢于，孢子的形狀大小也不相同，是分類(lèi)的重要依據。

放線(xiàn)菌的菌落早期和細菌菌落相似，后期形成孢子菌落呈粉狀、干燥，有各種顏色，
呈同心圓放射狀。

通過(guò)實(shí)驗認識放線(xiàn)菌的菌絲及孢子絲的形態(tài)和放線(xiàn)菌的菌落特征。

二、材料

顯微鏡、載玻片、酒精燈、接種環(huán)、石炭酸復紅、解剖刀、蓋玻片、培養皿、高氏1號合成培養基、豐加鏈霉菌及菌落。

三、方法與步驟

（一）水浸片法的制作及觀(guān)察

（1）取潔凈載玻片，滴加無(wú)菌水一滴。

（2）用接種環(huán)挑取經(jīng)過(guò)28~30℃培養4~5d的放線(xiàn)菌菌落少許，置于載玻片的無(wú)菌水滴內。

（3）取潔凈蓋玻片一塊，先將蓋玻片，端與液滴接觸，然后將整個(gè)玻片慢慢放下避免產(chǎn)生氣泡。置于顯微鏡下用高倍鏡觀(guān)察。

(二）印片法的制作及觀(guān)察

此法的優(yōu)點(diǎn)是不打亂孢子的排列狀態(tài)。

1.取菌 取2片干凈的載玻片，用解剖刀切取一個(gè)完整的放線(xiàn)菌菌落（帶培養基切下），放在一載玻片的中央（注意菌落應正放）。然后將另一載玻片在酒精燈下微微加熱后,蓋在這一菌落上面，用接種環(huán)或解剖刀輕輕按壓，然后小心拿下上面這塊玻片（不可在菌落上移動(dòng)）。

2.固定 將取下的這塊玻片，通過(guò)火焰固定。

3.染色 用石炭酸復紅染色30s，然后水洗，風(fēng)干。

4.鏡檢

(三〉埋片法的制作及觀(guān)察

(1)將培養基融化后倒入平板，待凝固后挑取少量放線(xiàn)菌孢子接人培養基上，在接種線(xiàn)旁?xún)A斜插人無(wú)菌蓋玻片。

（2）28〜30℃培養4〜5d后，菌絲沿玻片向上生長(cháng)，待菌絲長(cháng)好后，取出玻片放在一干凈載玻片上，置于顯微鏡下觀(guān)察。

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