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    運動(dòng)性檢查



    錄入時(shí)間:2015-3-30 13:14:09 來(lái)源:青島海博生物

     

    半固體瓊脂穿

    根據有鞭毛的細菌可以在半固體培養基中游動(dòng)卻又不能任意游走的現象,觀(guān)察細菌生長(cháng)情況,判定試驗菌是否有運動(dòng)性?墒褂迷囼灳芰己蒙L(cháng)的培養基,在其中加0.3%~0.6%的瓊脂,(所用的瓊脂量可因號不同而異一般半固體培養基應是放倒試管不流動(dòng),而在手上輕輕敲打時(shí)瓊脂即破裂為宜。對一般常見(jiàn)細菌可結合葡萄糖氧化發(fā)酵試驗觀(guān)察運動(dòng)性。

    用直針穿刺接種試驗菌于半固體培養基內,適溫培養。細菌的運動(dòng)性可用透射光目測。如生長(cháng)物只生長(cháng)在穿刺線(xiàn)上,邊緣分清晰,則表示試驗菌無(wú)運動(dòng)性;如生長(cháng)物由穿刺線(xiàn)向四周呈云霧狀擴散,其邊緣呈云霧狀,則表示試驗菌株有運動(dòng)性。對生長(cháng)快的細菌應培養1天后觀(guān)察。如第一天不能判定可在第23天再觀(guān)察。如2~3天時(shí)仍不能判定是否有運動(dòng)性,可延遲5~6天再觀(guān)察一次。因為游動(dòng)力弱的細,在半固體培養基中第1-2天中尚不能從穿刺線(xiàn)游開(kāi),故需多培養幾天觀(guān)察。如試驗菌在半固體培養基中產(chǎn)氣,氣泡會(huì )將穿刺線(xiàn)上的生長(cháng)物的擴散情況,不可誤將不運動(dòng)的細菌判為有運動(dòng)性。如試驗菌是好細菌,穿線(xiàn)上生長(cháng)物很少,可檢查從培養基表面向下滲入的生長(cháng)物的情況。

    鏡檢法

    用顯微鏡檢查細菌細胞是否能游動(dòng),可用普通顯微鏡或相差顯微鏡檢查。用普通顯微鏡時(shí)光線(xiàn)不宜太強,要適當減弱。檢查時(shí)應注意以下幾點(diǎn):

    (1)細菌細胞間有明顯位移者,才能判定為運動(dòng)性。由于細菌細胞太小,在懸液中有布朗運動(dòng),即每個(gè)細胞均在原地顫動(dòng),彼此的位置關(guān)系卻沒(méi)改變,切不可將這種現象誤判為具運動(dòng)性。由于載片與蓋片之間懸液過(guò)多,在使用油浸物鏡調焦時(shí),懸液在蓋玻片下流動(dòng)。這時(shí)可看到大批細菌細胞都以同一速度向同一方向運動(dòng),這也不是真正的運動(dòng)性。真正的運動(dòng)性應是細菌細胞彼此的位置關(guān)系明顯的改變。細菌的運動(dòng)性因種或菌株而異。有的運動(dòng)迅速,有的運動(dòng)緩慢。能運動(dòng)的菌株也不一定每個(gè)細胞都同時(shí)運動(dòng),常常是大多數細胞不運動(dòng)。少數細胞明顯運動(dòng)。

    (2)有些細胞不以鞭毛運動(dòng),而是滑動(dòng)。鏡檢時(shí)應注意與游動(dòng)區分開(kāi)。一般游動(dòng)速度高,滑動(dòng)則遲緩。游動(dòng)只能在懸液中運動(dòng),滑行則須附在固體表面進(jìn)行。

    (3)如室溫太低,以致載物臺溫度太低。有的細菌會(huì )因溫度太低而不能運動(dòng),應設法提高載物臺或載玻片的溫度,達到試驗菌能運動(dòng)的溫度(如在室溫較的試驗室鏡檢,或將載玻片放置保溫箱中一會(huì )兒再觀(guān)察)。

    (4)鏡檢好氧菌時(shí),則可能因蓋玻片下供氧不足而使試驗菌不能表現出運動(dòng)性,遇到這種情況則應使蓋玻片下殘留一二個(gè)小氣泡,鏡檢氣泡四周或蓋片邊緣處的細菌運動(dòng)性。

    5用油鏡檢吋,蓋玻片的厚度以不超過(guò)0.17mm為宜。用過(guò)厚的蓋玻片時(shí),調焦有困難。用相差油鏡觀(guān)察時(shí)載玻片的厚度約為1.2mm為宜。

     

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