液體培養

1.好氧菌的培養由于大多數撖生物都是好氧菌，且微生物只能利用溶于水中的氧，所以，如何保證在培養液中有較髙的溶解氧濃度就顯得特別重要。

在常壓（20℃）達到平衡時(shí)，氧在水中的溶解度僅為6.2ml/L，這些氧只能保證氧化8.3mg葡萄糖，僅相當培養基中常用葡萄糖濃度的1%。除葡萄糖外，培養基中的無(wú)機或有機養料一般都可保證微生物使用幾小時(shí)至幾天，因此，對好氧菌來(lái)說(shuō)，生長(cháng)的限制因子幾乎總是氧的供應，只有將培養液裝成淺層時(shí)，氧才不至于成為限制因子，在進(jìn)行液體培養時(shí)，一般可通過(guò)增加液體與氧的接觸面積或提高氧分壓來(lái)提高溶氧速率，具體措施有：①淺層液體培養；②利用往復式或旋轉式搖對三角瓶培養物作振蕩培養；③在深層液體培養器的底部通入加壓空氣，并用氣體分布器使其以小氣泡形式均勻噴出；④對培養液進(jìn)行機械攪拌，并在培養器的壁上設置阻擋裝置。

在實(shí)驗室進(jìn)行好氧細菌培養的具體方法有以下幾類(lèi)：

(1)試管液體培養裝液量可多可少。此法的通氣效果一般均不夠理想，僅適合培養兼性厭氧菌。

（2）三角瓶淺層培養在靜止狀態(tài)下，三角瓶?jì)鹊耐�氣狀況與其中裝液量（表7-9〉和棉塞通氣程度對微生物的生長(cháng)速度和生長(cháng)量有很大的關(guān)系。此法一般也僅適宜培養兼性厭氧菌。

〔3〕搖瓶培養即將三角瓶?jì)扰囵B液用3層紗布包住瓶口，以取代一般的棉花塞，同時(shí)降低瓶?jì)鹊难b液量，把它放到往復式或旋轉式搖床上作有節奏的振蕩，以達到摁高溶氧暈的目的，目前仍廣泛地用于菌種的篩選以及進(jìn)行生理、生化和發(fā)酵等試驗中。

（4）臺式發(fā)酵罐體積一般為幾升至幾十升，并有多種自動(dòng)控制和記錄裝置�，F成的商品種類(lèi)很多，用作發(fā)酵研究十分方便。

2.厭氧菌的培養在實(shí)驗室中，用液體培養基培養厭氧茵時(shí)，一般采用加有有機還原劑〔如巰基乙酸、半胱氨酸，維生素C或庖肉等）或無(wú)機還原劑（鐵絲等）的深層液體培養基，并在其上封以凡士林石蠟層，以保證它們的氧化還原電位達到150mV-420 mV的范圍。如果能將其放厭氧罐或厭氧箱中培養，則效果將會(huì )更好。

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