培養基pH的測定和調整

所有微生物都受到其生存環(huán)境中pH的影響。通常,選擇性物質(zhì)的存在會(huì )縮小它們生長(cháng)的pH范圍。有時(shí)，培養基的酸度或堿度也能作為一種生長(cháng)選擇因子。而對于生化測試培養基，微生物在基質(zhì)中顯示活性的的范圍比生長(cháng)所需的pH范圍窄。因此，將培養基的pH調至預期的范圍內是很重要的。當實(shí)驗室根據培養基成分自己配制培養基時(shí)，必須檢測并調整pH。必須指出的是，即使是生產(chǎn)廠(chǎng)商提供的現成的合成脫水培養基(尤其是對一些庫存的脫水培養基)，在制成實(shí)驗用培養基后也需要對其最終pH進(jìn)行測定。

測定培養基pH的最準確的方法是使用pH計，使用前必須用已知pH的（通常pH為4-7)標準緩沖溶液進(jìn)行校準。將pH計的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養基中，就可以從pH計的刻度讀出培養基的pH。每個(gè)生產(chǎn)廠(chǎng)商對每種不同pH計都提供有詳細的操作說(shuō)明。

配制培養基時(shí)，使用帶機械攪拌的pH計可以很容易地調整pH。

培養基位在能夠不停攪拌的容器(如大燒杯）中配制，最好使用磁力攪拌器，磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養基需在融化后調整其pH，用可加熱的磁力攪拌器很容易辦到。調節pH時(shí)用已知pH的標準緩沖液溶液先對pH計進(jìn)行校準。然后將復合電極和電阻溫度計(如果有)置于培養基，從燒杯遠離電極的一端緩慢加人適量的鹽酸和氫氧化鈉，保到培養基達到并保持所需的pH。

pH計的溫度補償應考慮到溫度對電極系統的影響：在一些稀釋液和培養基中，pH隨溫度的變化而有相當大的變化。對于液體培養基和稀釋液而言，通常既可以在25℃下,也可以在其使用時(shí)的溫度下調整和測定。

瓊脂培養基必須在溶解后進(jìn)行pH的調整，溶解的溫度在45℃以上。因此，固體培養基應在其使用溫度確定pH。這時(shí)應使用平頭的復合電極，同時(shí)用手動(dòng)校準pH計的溫度補償。在制備培養基時(shí),若測定出培養基在熔化狀態(tài)和凝固狀態(tài)的pH有所不同時(shí)，說(shuō)明在調整pH產(chǎn)生誤差。

同樣，制備的培養基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌〉時(shí)，也可能會(huì )產(chǎn)生pH的變化。對于脫水培養基，生產(chǎn)廠(chǎng)商己考慮到這一點(diǎn)，通常不謠要再調整其pH。但應認真核對待用培養基的pH。如果脫水的瓊脂培養基在再次溶解或制備的過(guò)程中必須調整pH，那么最好在滅菌操作步驟之后用過(guò)濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進(jìn)行調整，以避免造成因再次滅菌而形成的培養基的過(guò)度加熱。當用不同的原枓或藥品制備培養基時(shí)，必須在高壓滅菌后檢測培養基的pH。此外，如果發(fā)現培養基的在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變
化，可在配制培養基時(shí)對pH進(jìn)行適當調整。但仍需測定培養基滅菌后的最終pH。

上一篇：凍干菌株的復活和檢查

下一篇：溶血試驗