蠟狀芽孢桿菌(Baccillus cereus)食品中毒是由于食用了含有大量細菌〔通常為107個(gè)/g的食品所引起的(Goepfert等,1973)。食品中毒暴發(fā)后,對可疑食品進(jìn)行流行病學(xué)調查時(shí),不必使用選擇性培養基。蠟狀芽孢桿菌為需氧菌,能產(chǎn)生磷脂酶,可將樣品的稀釋液涂布在蛋黃瓊脂表面進(jìn)行菌落計數,革蘭氏染色后,在顯微鏡下檢查革蘭氏陽(yáng)性桿菌,并進(jìn)行生化試驗(見(jiàn)下文)。蠟狀芽孢桿菌和昆蟲(chóng)的病原體蘇云金芽孢桿菌非常接近,主要區別是蘇云金芽抱桿菌具有質(zhì)粒編碼并可對昆蟲(chóng)致病的δ-內毒素。δ-內毒素作為對孢晶狀包含體而被沉淀,能在顯微鏡下檢測到。Damgaard等(1996)發(fā)現蘇云金芽孢桿菌與蠟狀芽孢桿菌相似,多數菌株也具有細胞產(chǎn)毒性。Jackson等(1995)報道了從引起中毒的食品中分離出細胞產(chǎn)毒的蘇云金芽孢桿菌的事例。因蘇云金芽孢桿菌可作為農業(yè)殺蟲(chóng)劑,而旦能在土壤中生存,所以許多食品中都能檢測到該菌。從公眾健康的角度考慮,不能僅因為在顯微鏡下觀(guān)察到對孢晶狀體就將其鑒定為蘇云金芽孢桿菌,還需進(jìn)一步的分離。
現在已經(jīng)有廣枯草芽孢桿菌和地衣型芽孢桿菌等其他種類(lèi)芽孢菌引起食品中毒的報道(Kramer等,1982)。
蠟狀芽孢桿菌廣泛存在于各種環(huán)境中,許多食品中都含有少暈的蠟狀芽孢桿菌。所以不必采用選擇性增菌法對菌體進(jìn)行增殖。若食品中含有中等濃度的菌體,說(shuō)明蠟樣芽孢桿菌已經(jīng)增殖,這時(shí),食品已有潛在的危害?梢允褂眠x擇、鑒定培養基直接計數,如使用甘露醇卵黃苯酚紅多黏菌素瓊脂進(jìn)行樣品計數。ISO 7932:1993標準中使用了這種培養基。然而,菌體在MEPPA培養基上容易過(guò)度生長(cháng),這種培養基對甘露醇發(fā)酵產(chǎn)生的酸幾乎沒(méi)有緩沖作用(蠟狀芽孢桿菌不能發(fā)酵甘露醇、所以,建議使用Holbrook和Anderson(1980)的多黏菌素丙酮酸鹽卵黃甘露醇溴麝香草酚藍瓊脂(MEPPA)進(jìn)行蠟狀芽孢桿菌的平行計數:這種脫水培養基可從牛津公司購買(mǎi)。該培養基中含有丙酮酸鹽和蛋白胨,能提高卵磷脂酶的活性和菌體的產(chǎn)孢能力。但遺憾的是,該培養基的緩沖能力也很弱,所以最好先對樣品增菌24h后再接種平板。平板上生長(cháng)的可疑蠟狀芽孢桿菌菌落可用以下試驗進(jìn)行驗證:Hugh和Leifson培養基(測試葡萄糖的厭氧異化作用),明膠水解試驗,硝酸鹽還原試驗,Knisely水合氯醛瓊脂上生長(cháng)能力的測試,與甘露醇和木糖的反應試驗。
用JECRA試劑盒和牛津反向被動(dòng)膠乳凝集試劑盒可以檢測食品中的蠟狀芽孢桿菌腸毒素。
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