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凝集試驗
1.玻片法
(1)原理:用已知的診斷血清或血漿在玻片上與待檢菌及生理鹽水混合，若出現肉眼可見(jiàn)的特異性凝集塊，表示該菌即為相應的細菌。
(2) 方法:取一潔凈載玻片，用接種環(huán)取待檢菌培養物，分別與診斷血清及生理鹽水混勻，上下搖動(dòng)玻片數次， 1~3 min 后觀(guān)察結果。
(3)結果判斷: 陽(yáng)性——待檢菌明顯凝集，對照菌均勻混濁。陰性——待檢菌及對照菌均勻混濁。自凝——測定菌、對照菌均凝集(圖3 - 46) 。
(4) 注意事項: 某些細菌菌體表面常有一層表面抗原，如傷寒沙門(mén)菌的Vi 抗原及志賀菌屬的K 抗原等。它能阻抑菌體抗原與抗血清的凝集，從而導致假陰性結果。此時(shí)應將菌懸液于1000C 中煮沸1 h ，以破壞其表面抗原，然后再作試驗。
2 . 試管法
此法可排除玻片法凝集試驗的非特異性凝集，是一種半定量凝集試驗。
(1)方法: 取小試管1 0 支，第1 管加入生理鹽水0.45 時(shí)，再加入0. 05 ml 診斷血清混勻，其余各管均加生理鹽水0 . 25 ml ，然后從第1 管中吸出0.25 ml 加入第2 管中，棍勻后再吸出0.25 ml 加入第3 管，依次類(lèi)推直至第9 管，從第9 管吸出0 . 25 ml 棄去，第10 管不加抗血清為對照管。每管加待檢菌菌液(10 X 109 CFU/ ml)0 . 25ml 時(shí)，充分振蕩混勻后，置37℃水浴4 h ， 再置4℃中過(guò)夜。
(2) 結果判斷:以血清最高稀釋度達到(++)凝集者(管內液體澄清，部分凝集塊沉于管底)為該菌的凝集效價(jià)。若此效價(jià)達所用原診斷血清效價(jià)一半以上者為陽(yáng)性。
(3) 注意事項: 腦膜炎奈瑟菌的菌液必須經(jīng)56℃ 30 min 滅活，以破壞自溶酶。若試驗出現低凝集結果時(shí)，應將該菌傳代數次后，再做實(shí)驗。
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