菌種鑒定工作是各類(lèi)微生物學(xué)實(shí)驗室都經(jīng)常通到的基礎性工作丨不論鑒定對象雇皤一類(lèi),其工作步驟都離不開(kāi)以下三步:①獲得該微生物的純種培養物(pure culture)②測定一系列必要的鑒定指標;③査找權威性的鑒定手冊。
不同的微生物往往有自己不同的重點(diǎn)鑒定指標.例如,在鑒定形態(tài)特征較豐富、形體較大的真菌等微生物時(shí).常以其形態(tài)持征為主要指標;在鑒定放線(xiàn)菌和酵母菌時(shí),往往形態(tài)特征與生理特征兼用;而在鑒定形態(tài)特征較少的細菌時(shí),則須使用較多的生理、生化和遺傳等指標;在鑒定病毒時(shí),除使用電子顯微鏡和各種生化、免疫等技術(shù)外,還要使用一系列獨特的方法(在本節中未予介紹)。
通常把鑒定微生物的技術(shù)分成四個(gè)不同水平:①細胞的形態(tài)和習性水平,例如用經(jīng)典的研究方法,觀(guān)察細胞的形態(tài)特征、運動(dòng)性、酶反應、營(yíng)養要求和生長(cháng)條件等,②細胞組分水平,包括細胞組成成分例如細胞壁成分,細胞氰基酸庫,脂類(lèi),醌類(lèi),光合色素等的分析,所用的技術(shù)除常規實(shí)驗室技術(shù)外,還使用紅外光譜、氣相色譜和質(zhì)譜分析等新技術(shù)。③蛋白質(zhì)水平,包括氨基酸序列分析、凝膠電泳和血請學(xué)反應等若干現代技術(shù),④基因或DNA水平,包括核酸分子雜交(DNA與DNA或DNA與RNA), G+C mol%值的測定,遺傳信息的轉化和轉導,16sRNA(核糖體RNA)寡核苷酸組分分析,以及DNA與RNA的核苷酸順序分析等,在微生物分類(lèi)學(xué)發(fā)展的早期,主要的分類(lèi)鑒定指標尚停留在細胞的形態(tài)和習性水平上,這類(lèi)方法可稱(chēng)作經(jīng)典的分類(lèi)鑒定方法;從本世紀60年代起,后三個(gè)水平的分類(lèi)鑒定的理論和技術(shù)即化學(xué)分類(lèi)學(xué)開(kāi)始發(fā)展,并為探索微生物的自然分類(lèi)系統打下了堅實(shí)的基礎,這些方法再加上數值分類(lèi)法,可稱(chēng)為現代的分類(lèi)鑒定方法。
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