抗生素對微生物生長(cháng)的最低抑制濃度的測定

很多化學(xué)藥劑都可以抑制微生物的生長(cháng)。 最低抑制濃度（minimal inhibition concentration, MIC）是指藥物抑制微生物生長(cháng)的最低濃度。由于微生物對藥物的耐受性不同，因此，最低抑制濃度是有差異的。 可以采用固體或液體培養的方式進(jìn)行測定，通過(guò)制備含有不同濃度的抗生素平板，將供試菌株接種，然后將平板置適宜溫度下培養一定時(shí)間，觀(guān)察菌株生長(cháng)情況。判斷MIC 可以供試菌株不生長(cháng)的平板所含的藥劑濃度，也可以按重復接種點(diǎn)長(cháng)出的菌落數少于5 個(gè)者作為MIC 標準。固體平板法的優(yōu)點(diǎn)是在一個(gè)平板上可同時(shí)點(diǎn)接多個(gè)菌株。值得注意的是，當加入藥劑后，需要立即充分搖勻后再制備平板，否則藥劑分散不均勻，會(huì )影響結果。

另一種方法是液體稀釋法，將一定培養液中加入不同濃度的藥劑，配置成一定濃度梯度，再將制備好的菌懸液按一定體積接種，置一定溫度培養后，可通過(guò)肉眼或分光光度計測定濁度，以不能生長(cháng)菌株的試管內藥劑的濃度為MIC, 藥劑的濃度以μ（單位）/ml 或μg/ml 表示。

本實(shí)驗學(xué)習液體法檢測鏈霉素對細菌的最低抑制濃度。

材料

1. 菌株： 大腸桿菌（E. coli）; 金黃葡萄球菌（S. aureus）

2. 培養基： 牛肉膏蛋白胨培養基（液體）

3．藥劑： 鏈霉素：1000 μ（單位）/ml (過(guò)濾滅菌)

4．器皿： 無(wú)菌培養皿，無(wú)菌移液管（1ml, 5ml）， 無(wú)菌試管，無(wú)菌水，分光光度計

方法

1．取活化好的菌種斜面，分別挑取一環(huán)接種于液體培養基中，在37℃下培養6-8 小時(shí)，作為測試菌液

2．按下表配置不同鏈霉素濃度的培養基（每個(gè)試管3 個(gè)重復）：

3．分別取0.2ml 菌液加入上述試管中，充分混勻，另做兩個(gè)對照，即：只含菌和只含藥劑

4． 將試管置37℃溫箱培養12-24 小時(shí)，取出試管，充分振蕩，用肉眼觀(guān)察每個(gè)試管濁度，也可用分光光度計檢測濁度。

結果：

注意：

1．注意菌齡適宜，接種量一致，避免人為因素干擾結果；

2．加入藥物立即混勻后再接入菌種

3．每個(gè)處理應設3 個(gè)重復

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