厭氧培養方法介紹

 厭氧培養方法介紹

  常用的厭氧培養方法主要有二大類(lèi)，包括化學(xué)厭氧培養方法和物理厭氧培養方法，他們分別通過(guò)化學(xué)和物理的方法來(lái)制造厭氧環(huán)境，從而有利于厭氧菌的生長(cháng)繁殖。

（一）化學(xué)厭氧培養法

  常用為厭氧生物袋培養法：厭氧生物袋是一種特制不透氣的塑料袋，袋中裝有氣體發(fā)生管、催化劑小管(內放鈀粒)和氧化還原指示劑小管(美藍)．接種好的平板放入袋中，排出袋中氣體，卷疊好袋口，用彈簧夾莢緊，然后折斷氣體發(fā)生小管中安瓿，使發(fā)生反應產(chǎn)生CO2、H2 等，在催化劑鈀的作用下，H2+O2(袋中剩余氧) H2O，這更保證了無(wú)氧環(huán)境，經(jīng)0.5h 再折斷指示劑管中美藍液安瓿(美藍在無(wú)氧環(huán)境中呈無(wú)色美白，在有氧環(huán)境中又可變成藍色的美藍)，如指示劑不變藍，表示袋內已成無(wú)氧環(huán)境，此時(shí)即可放37℃孵育培養。厭氧產(chǎn)氣管成份；碳酸氫鈉、磞氫化鉀、5％檸檬酸溶液。厭氧指示管成份：0.002％美藍、10％堿性葡萄糖。催化反應管成份：鈀(A 型)。

（二）物理厭氧培養方法

1、厭氧缸培養法

  厭氧缸是一個(gè)可密封的玻璃缸，頂端有一個(gè)抽氣口，使用方法如下：A.將接種厭氧菌的平板立即放入厭氧缸。B.在厭氧缸內放入冷催化劑鈀粒和美蘭指示劑安瓿。C.用真空泵抽去缸中的空氣，使缸內大氣壓降到10％毫米汞柱，然后充入氮氣，反復三次。最后充入80％氮氣，10％二氧化碳及10％氫氣。D.密閉厭氧缸。此時(shí)，缸內99％的氧氣已被氮氣，二氧化碳及氫氣置換，殘余的氧氣，在鈀粒催化下與氫氣作用生成水，缸壁會(huì )有水滴出現。缸內美蘭指示劑由淺蘭色轉變?yōu)闊o(wú)色，表示缸內氧氣已被驅除。E.放入37℃，培養48 小時(shí)后觀(guān)察結果。

2、厭氧箱培養法

  為專(zhuān)門(mén)培養厭氧菌的培養箱，現多為全自動(dòng)控制，當將培養物放入培養箱，關(guān)上封閉門(mén)后，其自動(dòng)啟動(dòng)，通過(guò)多次抽掉空氣，灌入氮氣、二氧化碳及氫氣，最后形成厭氧環(huán)境。培養48 小時(shí)后即可取出培養物，觀(guān)察結果。

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