低溫誘導霉菌分生孢子同步生長(cháng)實(shí)驗

  使培養液中微生物的生理狀態(tài)比較一致，生長(cháng)發(fā)育處在同一階段的培養方法稱(chēng)同步培養法。同步培養的方法很多，最常用的有選擇法和誘導法兩種。
(一）選擇法

  選擇法是通過(guò)過(guò)濾、密度梯度離心、膜吸附和直接選擇等方法，從細胞群體中選擇處于同一生長(cháng)發(fā)育階段的細胞來(lái)進(jìn)行培養的方法。 

1、離心沉降分離法  處于不同生長(cháng)階段的細胞’其個(gè)體大小不同，通過(guò)離心就可在一定程度分開(kāi)，然后用同樣大小的細胞進(jìn)行培養便可獲得同步培養。

2過(guò)濾分離法  用孔徑不同的微孔濾膜可將大小不同的細胞分開(kāi)，剛分裂的幼齡菌體較小，能通過(guò)濾孔，其余菌體留在濾膜上面，將濾液中的幼齡細胞進(jìn)行培養，就可得到同步培養物。

3.硝酸纖維素薄膜法  先將菌液通過(guò)硝酸纖維素薄膜，由于細菌與濾膜帶有不同電荷，所以細菌能吸附于膜上，翻轉薄膜，再用新鮮培養液濾過(guò)培養，附著(zhù)于膜上的細菌分離后的子細胞由于不與薄膜直接接觸，及菌體本身的重量，加之附著(zhù)著(zhù)培養物液的重量，便下落到收集器內，短時(shí)間內用收集內的細菌接種培養，便可得到同步培養物。

選擇法同步培養是在不影響曲體代謝下獲得的，因而菌體的生命活動(dòng)較為正常，但也有其缺點(diǎn)，一些微生物即使個(gè)體大小相同時(shí)，其發(fā)育階段也可能不完全一致，這樣的微生物不宜采用這種方法。
(二）誘導法

  誘導法主要是通過(guò)控制環(huán)境條件如溫度、營(yíng)養物質(zhì)等來(lái)誘導同步生長(cháng)。
1.溫度調整法  將微生物的培養溫度控制在亞適溫度一段時(shí)間，使其緩慢地進(jìn)行代謝，但又不進(jìn)行分裂。然后將培養溫度提高到最適生長(cháng)溫度，大多數細胞就會(huì )同步分裂。
2.營(yíng)養條件調整法  控制營(yíng)養物的濃度或組成以達到同步生長(cháng)。限制碳源或其他營(yíng)養物，使細胞只能進(jìn)行一次分裂而不能繼續生長(cháng)，從而獲得剛分裂的細胞群體，然后再轉入適宜的培養基屮.它們便進(jìn)入同步生長(cháng)。

  誘導法除上述兩種外還有其他方法，誘導法的缺點(diǎn)是會(huì )給細胞的正常代謝帶來(lái)一些不利影響。

  材料

黑曲霉斜面菌種.麥芽汁平板4個(gè)

方法與步驟

1.孢子懸液的制備  取數環(huán)孢子放入盛有50ml無(wú)菌水的三角瓶中（瓶?jì)确挪Ａе槿?/span>干）

充分振蕩，制成孢子懸液，孢子量約10⁵個(gè)/ml。

2.用鑷子取圓形無(wú)菌玻璃紙1張（與培養皿直徑大小相似），放在麥芽汁平板上。
3.取孢子懸液0.1ml放在上述平板上，用玻璃涂布器涂布均勻，置于冰箱（4℃）2h然后取出，放入30℃溫箱培養1h。同時(shí)設一對照，不經(jīng)低溫處理直接放入30℃溫箱培養11h。

4.鏡檢  計算孢廠(chǎng)出芽率，并比較菌絲生長(cháng)情況。

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