微生物菌落的觀(guān)察

              微生物菌落的觀(guān)察
 
一、實(shí)驗目的和內容
目的：識別細菌、酵母菌、放線(xiàn)菌和霉菌四大類(lèi)微生物的菌落特征。
內容： 
1．觀(guān)察已知菌的菌落的形態(tài)、大小、色澤、透明度、致密度和邊緣等特征。
2．根據菌落的形態(tài)特征判斷未知菌的類(lèi)別。
二、實(shí)驗材料和用具
大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粘紅酵母(Rhodotorula gracitis)、熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)、細黃鏈霉菌(Streptomyces microflavus，又稱(chēng)“5406”抗生菌)、灰色鏈霉菌(Streptomyces griseus )、黑曲霉(Aspergillus niger )、產(chǎn)黃青霉(Penicillium chrysogenum)、球孢白伍菌(Beauveria bassiana)等細菌的斜面菌種。
牛肉膏蛋白胨培養基、馬鈴薯培養基、高氏1號培養基、無(wú)菌水。
接種環(huán)、接種針、酒精燈、無(wú)菌培養皿多套、電熱恒溫箱。
三、操作步驟
(一)制備已知菌的單菌落
1．制備平板 將已融化的無(wú)菌培養基待冷卻至50℃左右，分別制備牛肉膏蛋白胨培養基平板、馬鈴薯蔗糖培養基平板和高氏1號培養基平板各一皿。
2．制備菌懸液或孢子懸液  在培養好的斜面菌種管內加入5mL無(wú)菌水，制成菌懸液后備用。
3．制備單菌落 通過(guò)平板劃線(xiàn)法獲得細菌、酵母菌和放線(xiàn)菌的單菌落。用三點(diǎn)接種法獲得霉菌的單菌落。細菌于37℃恒溫培養24～48h，酵母菌于28℃培養2～3d，霉菌和放線(xiàn)菌置28℃培養5～7d，待長(cháng)成菌落后，仔細觀(guān)察四大類(lèi)微生物菌落的形態(tài)特征，并將觀(guān)察結果記錄于表4-1中。
(二)制備未知菌落
l．倒平板
2．接種   可用彈土法接種，其要點(diǎn)為：采集校園土壤，待風(fēng)干磨碎后，可將細土撒在無(wú)菌的硬板紙表面，先彈去紙面浮土，然后打開(kāi)皿蓋，便含土的紙面對著(zhù)平板培養基的表面，用手指在硬板紙背面輕輕一彈即可接種上各種微生物。
3．培養   將牛肉膏蛋白胨培養基平板倒置于37℃培養箱中恒溫培養2～3d，將馬鈴薯蔗糖培養基倒置于28℃培養箱中恒溫培養3～5d，即可獲得未知菌的單菌落。
4．編號   從培養好的未知平板中，挑選8個(gè)不同的單菌落，逐個(gè)編號，根據菌落識別要點(diǎn)區分未知菌落類(lèi)群，并將判斷結果填入表4～2中。
(三)直接觀(guān)察菌落
直接用實(shí)驗3中的“土壤稀釋分離”獲得的單菌落進(jìn)行觀(guān)察識別，并將結果填入表4-2中。
四、注意事項
觀(guān)察菌落特點(diǎn)時(shí)，要選擇分離得很開(kāi)的單個(gè)較大菌落；已知菌落和未知菌落要編好號，請勿隨意移動(dòng)開(kāi)蓋，以免搞混菌號。
五、實(shí)驗報告
1．已知菌落的形態(tài)特征記錄于表4～1中。
2．將未知菌落的辨別結果記錄于表4～2中。
七、問(wèn)題和思考
1．試比較細菌、放線(xiàn)菌、酵母菌和霉菌菌落形態(tài)的差異?
2．設計一個(gè)實(shí)驗，檢測實(shí)驗室空氣環(huán)境中的微生物類(lèi)別?
   
   

 

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