染色鏡檢
將上述可疑純培養物做革蘭氏染色并做濕片檢查; 利斯特菌為革蘭氏陽(yáng)性短桿菌, 大小為0.4~0.5μm×0.5~2.0μm;用生理鹽水制成菌懸液, 在油鏡或相差顯微鏡下觀(guān)察, 該菌出現輕微旋轉或翻滾樣的運動(dòng)。
該菌為革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢桿菌,在純培養物中呈短小桿菌,在初齡培養物中呈球桿菌狀,在老齡培養物中呈長(cháng)絲的長(cháng)桿菌狀,有些細菌因此而變成革蘭氏陰性;為需氧或兼性厭氧菌,在20~25℃培養時(shí)能形成4根鞭毛,運動(dòng)活潑;在37℃培養時(shí)無(wú)鞭毛,運動(dòng)消失。
1.初篩
在我們前期工作中發(fā)現,高污染樣品在選擇性瓊脂平板上可疑菌落較多,為避免漏檢和減少工作量,增加初篩步驟:挑取典型或可疑菌落接種在木糖、鼠李糖發(fā)酵管中,無(wú)須燒環(huán)同時(shí)TSA-YE平板上劃線(xiàn)分離純菌。
初篩及純培養
自選擇性瓊脂平板上分別挑取5個(gè)以上典型或可疑菌落,分別接種在木糖、鼠李糖發(fā)酵管,于37℃培養24h;同時(shí)在胰酪胨大豆瓊脂培養基(TSA-YE)平板上劃線(xiàn)純化,于30℃培養24h-48h。木糖陰性為藍色,鼠李糖陽(yáng)性為黃色,在TSA-YE平板上可疑菌落為淡藍色。
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