干熱滅菌
(一)目的要求
1.了解干熱滅菌的原理和應用范圍。
2.學(xué)習干熱滅菌的操作技術(shù)。
(二)基本原理
干熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內的蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。細胞內的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有關(guān),在菌體受熱時(shí),當環(huán)境和細胞內含水量越大,則蛋白蛋凝固就越快,反之含水量越少,凝固緩慢。因此,與濕熱滅菌相比,干熱滅菌所需溫度要高(160~170℃),時(shí)間要長(cháng)(1~2h),但干熱滅菌溫度不能超過(guò)180℃,否則,包器皿的紙或棉塞就會(huì )燒焦,甚至引起燃燒。干熱滅菌使用的電烘箱的結構如圖2-1。
(三)器材
培養皿、試管、吸管、電烘箱等。
(四)操作步驟
1.裝入待滅菌物品
將包好的待滅菌物品(培養皿、試管,吸管等)放入電烘箱內,關(guān)好箱門(mén)。
物品不要擺得太擠,以免妨礙空氣流通,滅菌物品不要接觸電烘箱內壁的鐵板,以防包裝紙烤焦起火。
2.升溫
接通電源,撥動(dòng)開(kāi)關(guān),打開(kāi)電烘箱排氣孔,旋動(dòng)恒溫調節器至綠燈亮,讓溫度逐漸上升。當溫度升至100℃時(shí),關(guān)閉排氣孔。在升溫過(guò)程中,如果紅燈熄滅,綠燈亮,表示箱內停止加溫,此時(shí)如果還未達到所需的160—170℃溫度,則需轉動(dòng)調節器使紅燈再亮,如此反復調節,直至達到所需溫度。
3.恒溫
當溫度升達到160~170℃時(shí),恒溫調節器會(huì )自動(dòng)控制調節溫度,保持此溫度2h。
干熱火菌過(guò)程。嚴防恒溫調節的自動(dòng)控制失靈而造成安全事故。
4.降溫
切斷電源、自然降溫。
5.開(kāi)箱取物
待電烘箱內溫度降到70℃以下后,打開(kāi)箱門(mén),取出滅菌物品。
電烘箱內溫度末降到70℃,切勿自行打開(kāi)箱門(mén)以免驟然降溫導致玻璃器皿炸裂。
(五)實(shí)驗報告
思考題
l.在干熱滅菌操作過(guò)程中應注意哪些問(wèn)題,為什么?
2.為什么干熱火菌比濕熱滅菌所需要的溫度要高,時(shí)間要長(cháng)?請設計干熱滅菌和濕熱滅菌效果比較實(shí)驗方案。
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