乳酸菌的鑒定

用1 mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1.0 mL，沿管壁緩慢注于裝有9 mL0.85％生理鹽水的無(wú)菌試管中（注意吸管尖端不要觸及稀釋液），振搖試管或換用1支無(wú)菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。

另取1 mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸頭，按上述操作順序，做10倍遞增樣品勻液，如此每遞增稀釋一次，即換用1次1 mL滅菌吸管或吸頭。

根據食品衛生標準要求或對檢樣污染情況的估計，選擇三個(gè)連續的適宜稀釋度，每個(gè)稀釋度吸取0.1 mL稀釋液于MRS瓊脂平板或MC瓊脂平板進(jìn)行表面涂布，每個(gè)稀釋度作兩個(gè)平皿。MC瓊脂平板用于嗜熱鏈球菌的計數。含雙歧桿菌的樣品需絕對厭氧，置36 ℃±1 ℃恒溫箱內培養48 h±2 h,不含雙歧桿菌的樣品需兼性厭氧，置36 ℃±1 ℃恒溫箱內培養48 h±2 h,培養后選取菌落數在30～300之間的平板進(jìn)行計數。乳酸菌在MRS和MC培養基上菌落生長(cháng)形態(tài)特征。

         挑取3個(gè)或以上的可疑菌落，嗜熱鏈球菌接種于MC瓊脂平板，乳桿菌屬和雙歧桿菌屬接種于MRS瓊脂平板，雙歧桿菌需絕對厭氧，置36 ℃±1 ℃恒溫箱內培養48 h±2 h，不含雙歧桿菌需兼性厭氧，置36 ℃±1℃恒溫箱內培養48 h±2 h。

鑒定

         涂片鏡檢：乳桿菌屬細胞形態(tài)多樣，從長(cháng)的桿狀和細長(cháng)桿狀到彎曲桿狀及短桿狀，一般形成鏈。通常不運動(dòng)。無(wú)芽胞，革蘭氏染色陽(yáng)性。嗜熱鏈球菌形態(tài)為球形或球桿狀，直徑為0.5 μm～2.0 μm，細胞成對或成鏈排列，無(wú)芽胞，革蘭氏染色陽(yáng)性。雙歧桿菌屬細胞呈多樣形態(tài)，有較規則短桿狀或纖細桿狀具有尖細末段的細胞，也有呈球形者，可形成各種分支或分叉形。無(wú)芽胞，革蘭氏染色陽(yáng)性。

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