銅綠假單胞菌產(chǎn)氨實(shí)驗與氧化酶試驗

原理：銅綠假單胞菌產(chǎn)生一種脫酰胺酶，可使乙酰胺經(jīng)脫酰胺作用釋放氨，滴加納氏試劑（碘化汞鉀），氨（NH4+）在堿性條件下與碘化汞鉀作用，生成紅色的絡(luò )合物。

  操作：將純培養物接種到裝有乙酰胺肉湯的試管中，在36℃±1℃下培養20h～24h。然后向每支試管培養物加入1～2滴鈉氏試劑，檢查各試管的產(chǎn)氨情況，如表現出從深黃色到磚紅色的顏色變化，則為陽(yáng)性結果，否則為陰性。

原理：氧化酶（細胞色素氧化酶）是細胞色素呼吸酶系統的最終呼吸酶。具有氧化酶的細菌，首先使細胞色素C氧化，再由氧化型細胞色素C使對苯二胺氧化，生成有色的醌類(lèi)化合物。

 操作：取2～3滴新鮮配制的氧化酶試劑滴到放于平皿里的潔凈濾紙上。用鉑金絲接種環(huán)或玻璃棒，將適量的純種培養物涂布在預備好的濾紙上。在10秒內顯深藍紫色的視為陽(yáng)性反應。也可以按照商品化氧化酶測試產(chǎn)品的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行該項測試。

產(chǎn)熒光素實(shí)驗（金氏B培養基）

原理：蛋白胨提供氮源；磷酸鹽促進(jìn)熒光素的產(chǎn)生并抑制綠膿色素的產(chǎn)生；硫酸鎂為熒光素的產(chǎn)生提供必須的陽(yáng)離子；瓊脂使培養基的凝固。

操作：將上述呈紅褐色的且氧化酶反應呈陽(yáng)性的培養物接種于金氏B培養基上，于36℃±1℃恒溫箱培養24h～5d。每天需取出在紫外燈下檢查其是否產(chǎn)生熒光，將5d內產(chǎn)生熒光的菌落記錄為陽(yáng)性。

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