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增菌培養
第一步增菌培養：用Half-Fraser肉湯，30℃培養24h
第二步增菌培養：用Fraser肉湯，從Half-Fraser肉湯中取0.1ml培養液加入10ml Fraser肉湯中,35℃培養24-48小時(shí)。
選擇性分離培養
取0.1ml 30±2℃培養24h Half-Fraser肉湯培養物，劃線(xiàn)接種到PALCAM平板上， 35℃培養24-48小時(shí)，檢查有無(wú)黑色菌落，并菌落外圍有黑色環(huán)。 Fraser肉湯培養24小時(shí)，出現明顯黑色，取0.1±0.02ml培養物接種到MOX平板上35℃至少培養24小時(shí)，若Fraser肉湯培養24小時(shí)，沒(méi)有出現明顯黑色，繼續培養至48小時(shí)，出現明顯黑色，取0.1ml培養物接種到PALCAM平板上35℃至少培養24小時(shí)。若培養48小時(shí)，仍沒(méi)有出現明顯黑色，并在PALCAM上沒(méi)有可疑菌落，則此樣品為單增李斯特氏菌陰性。
ISO方法中，增菌培養采用二步增菌培養法，并可通過(guò)增菌液的顏色變化來(lái)判斷有無(wú)李斯特氏菌，所采用的增菌培養基為Half-Fraser 肉湯和Fraser肉湯。所用的分離平板為PALCAM培養基。本方法幾乎可用于所有食品中李斯特氏菌的檢測。
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