肉毒梭菌毒素檢測

檢樣經(jīng)均質(zhì)處理后，及時(shí)接種培養，進(jìn)行增菌、產(chǎn)毒，同時(shí)進(jìn)行毒素檢測試驗。

肉毒毒素檢測 肉毒毒素的毒性極強，所以處理所有被懷疑含該毒素的材料時(shí)必須謹慎。

     標本的采集、運輸及保存

食品標本：可疑食品采集后應盡快送檢，密封食品，直至檢驗開(kāi)始以前不要啟封，非密封食品應采集于滅菌容器中，若需要遠運，標本應裝入嚴密的容器，置于冰壺中冷藏。

體液或組織標本：發(fā)生肉毒中毒時(shí)，若能直接從患者血清中檢出肉毒毒素，是最可靠的實(shí)驗室診斷。采血量應足夠中和試驗用。血清、嘔吐物、糞便及尸體標本均須裝入滅菌容器中，盡快送檢。水產(chǎn)動(dòng)物的臟器標本應以消化道為主。

土壤：以滅菌工具由地表面下10~20cm處取土，裝入滅菌容器。

    標本的處理

為了盡量保持肉毒毒素的穩定，稀釋液應用明膠磷酸鹽緩沖液。

血清分離后可直接供作肉毒毒素檢測試驗，無(wú)需另加處理。

液狀檢樣可直接離心，固體或半流動(dòng)檢樣須加適量（例如等量、倍量或 5倍量、10 倍量）明膠磷酸鹽緩沖液浸泡、研碎，然后離心，取上清液進(jìn)行檢測。 另取一部分上清液，調 pH6.2，每 9 份加 10%胰酶（活力 1：250）水溶液 1份，混勻，不斷輕輕攪動(dòng)，37℃作用 60 min，進(jìn)行檢測。（E 型及非蛋白分解的B、F型肉毒梭菌產(chǎn)生的前體毒素，做動(dòng)物試驗時(shí)，須激活，使之變?yōu)榛罨�毒素。�?nbsp;

肉毒毒素方法介紹

小鼠生物檢測：是目前唯一被公認的確認肉毒毒素的方法，是檢測肉毒毒素的金標準。

基于免疫化學(xué)的檢測方法（A、B、E、F型肉素的檢測）：

 ELISA法：用來(lái)檢測肉毒毒素已經(jīng)有20多年了，但是常規ELISA的檢測靈敏度遠遠低于小鼠生物檢測。目前試用的有amp-ELISA、DIG- ELISA，提高了靈敏度，此方法已被用于檢測食物樣品，檢測時(shí)間大約需要6h。但是存在型間交叉的問(wèn)題，陽(yáng)性樣品仍需小鼠生物檢測法進(jìn)行確認。

 PCR法：目前還沒(méi)有用此方法檢測樣品，原因是其靈敏度非常高，容易受樣品基質(zhì)的干擾得至假陽(yáng)性結果。檢測純水中的毒素只需3h。

 目前已發(fā)表或試用的其它方法：免疫電泳法、放射免疫法、瓊脂凝膠擴散法等。但這些方法的敏感性都不如小鼠生物檢測法高

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