海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
樣品的稀釋
固體和半固體樣品：稱(chēng)取25 g 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內，8000 r/min～10000 r/min 均質(zhì)1 min～2 min，或放入盛有225mL 稀釋液的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min～2min，制成1:10 的樣品勻液。
液體樣品：以無(wú)菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶/（瓶?jì)阮A置適當數量的無(wú)菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1:10 的樣品勻液�；蚍湃胧⒂�225 mL 稀釋液的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min～2 min，制成1:10 的樣品勻液。
用1 mL 無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1 mL，沿管壁緩慢注
于盛有9 mL 稀釋液的無(wú)菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1 支無(wú)菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1:100 的樣品勻液。
制備10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1 次1 mL 無(wú)菌吸管或吸頭。
根據對樣品污染狀況的估計，選擇2 個(gè)～3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液（液
體樣品可包括原液），在進(jìn)行10 倍遞增稀釋時(shí)，吸取1 mL 樣品勻液于無(wú)菌平皿內，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取1 mL 空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內作空白對照。
及時(shí)將15 mL～20 mL 冷卻至46 ℃的平板計數瓊脂培養基（可放置于46 ℃±1 ℃恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉動(dòng)平皿使其混合均勻。
培養
瓊脂凝固后，將平板翻轉，36 ℃±1 ℃培養48 h±2 h。水產(chǎn)品30 ℃±1 ℃培養72 h±3 h。
如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面彌漫生長(cháng)的菌落時(shí)，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養基（約4 mL），凝固后翻轉平板，進(jìn)行培養。
上一篇：菌株保存保藏方法
下一篇：大腸菌群平板計數與菌落選擇
