小玻管法: 將半固體管(每管約1 mL~2 mL) 在酒精燈上溶化并冷至
50 ℃,取已知相的H 因子血清0.05 mL~0.1 mL,加入于溶化的半固體內,混勻后,用毛細吸管吸取分裝于供位相變異試驗的小玻管內,俟凝固后,用接種針挑取待檢菌,接種于一端。將小玻管平放在平皿內,并在其旁放一團濕棉花,以防瓊脂中水分蒸發(fā)而干縮,每天檢查結果,待另一相細菌解離后,可以從另一端挑取細菌進(jìn)行檢查。培養基內血清的濃度應有適當的比例,過(guò)高時(shí)細菌不能生長(cháng),過(guò)低時(shí)同一相細菌的動(dòng)力不能抑制。一般按原血清1:200~1:800 的量加入。
小倒管法:將兩端開(kāi)口的小玻管 (下端開(kāi)口要留一個(gè)缺口,不要平齊) 放在半固體管內,小玻管的上端應高出于培養基的表面,滅菌后備用。臨用時(shí)在酒精燈上加熱溶化,冷至50 ℃,挑取因子血清1 環(huán),加入小套管中的半固體內,略加攪動(dòng),使其混勻,俟凝固后,將待檢菌株接種于小套管中的半固體表層內,每天檢查結果,待另一相細菌解離后,可從套管外的半固體表面取菌檢查,或轉種1%軟瓊脂斜面,于37 ℃培養后再做凝集試驗。
簡(jiǎn)易平板法:將0.35~0.4%半固體瓊脂平板烘干表面水分,挑取因子血清1環(huán),滴在半固體平板表面,放置片刻,待血清吸收到瓊脂內,在血清部位的中央點(diǎn)種待檢菌株,培養后,在形成蔓延生長(cháng)的菌苔邊緣取菌檢查。
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