增菌
以無(wú)菌操作取檢樣25g(或25 mL),加入裝有滅菌225 mL 志賀氏菌增菌肉
湯的均質(zhì)杯,用旋轉刀片式均質(zhì)器以8 000~10 000 r/min 均質(zhì);或加入裝有225mL 志賀氏菌增菌肉湯的均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器連續均質(zhì)1 min~2 min。液體樣品振蕩混勻即可。于41.5 ℃±1℃,16 h~20 h 厭氧培養。
分離
取增菌后的志賀氏增菌液分別劃線(xiàn)接種于XLD 瓊脂平板和MAC 瓊脂平板或志賀氏菌顯色培養基平板上,于36 ℃1 ℃培養20 h~24 h,觀(guān)察各個(gè)平板上
生長(cháng)的菌落形態(tài),志賀氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征見(jiàn)表1。宋內氏志賀氏菌的單個(gè)菌落直徑大于其它志賀氏菌。若出現的菌落不典型或菌落較小不易觀(guān)察,則繼續培養至48 h 再進(jìn)行觀(guān)察。
選擇性瓊脂平板 志賀氏菌的菌落特征
MAC 瓊脂 無(wú)色至淺粉紅色,半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊。
XLD 瓊脂 粉紅色至無(wú)色,半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊。
志賀氏菌顯色培養基 按照顯色培養基的說(shuō)明進(jìn)行判定。
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