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常規培養方法
檢查麥康凱瓊脂平板，志賀氏菌的菌落為淺粉紅色，半透明，將此可疑菌落接種于下列培養基中：葡萄糖肉湯，TSI 瓊脂斜面，賴(lài)氨酸脫羧酶肉湯，動(dòng)力試驗瓊脂和胰胨。置35℃培養48h，但應在20h進(jìn)行檢查，棄去所有有動(dòng)力、產(chǎn)H2S、產(chǎn)氣、賴(lài)氨酸脫羧以及發(fā)酵蔗糖與乳糖的培養物。關(guān)于產(chǎn)生吲哚者，應棄去其44℃增菌物中的陽(yáng)性培養物。至于42℃增菌培養中的所有可疑培養物皆有可能是陽(yáng)性或是陰性，因此皆應予保留。
生理學(xué)性狀
將初篩反應良好的培養物再接種其他生化試驗，志賀氏菌的特性概述如下分離：H2S、尿素酶、葡萄糖、（產(chǎn)氣）運動(dòng)、賴(lài)氨酸、脫羧酶、蔗糖、側金盞花醇、乳糖（2日）、KCN、丙二酸鹽、檸檬酸鹽、與水楊素皆為陰性；甲基紅為陽(yáng)性。用抗血清鑒定其血清型或參照表二所列32個(gè)血清型的生物學(xué)特性進(jìn)行試驗。其粘液酸鹽（mucate）和乙酸鹽（acetate）的反應是會(huì )有所幫助的。在這些反應中志賀氏菌一般為陰性，而不產(chǎn)氣的大腸桿菌一般至少在此反應中的一項為陽(yáng)性。
血清學(xué)性狀:
將犢牛肉浸汁瓊脂斜面的24h培養物混懸于3mL0.85%生理鹽水中,使其濃度相當于標準比濁管第5號,在潔凈的玻璃平皿上用蠟筆標記9個(gè)3x1cm的方塊.按照以下方案滴加混懸液，抗血清與生理鹽水。
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