生化鑒定培養基質(zhì)控和反應原理

細菌生化試驗原理

      各種細菌所具有的酶系統不盡相同，對營(yíng)養基質(zhì)的分解能力也不一樣，因而代謝產(chǎn)物或多或少地各有區別，可供鑒別細菌之用。用生化試驗的方法檢測細菌對各種基質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物，從而鑒別細菌的種屬，稱(chēng)之為細菌的生化反應。

糖發(fā)酵試驗

  微生物能在有氧或無(wú)氧條件下代謝各種糖或醇能力，從而進(jìn)行各種細菌的鑒別。

靛基質(zhì)(吲哚)試驗原理

 將被檢菌接種到蛋白胨培養基中，36±1℃培養18h-24h后，沿試管壁滴加數滴吲哚試劑于培養物液面，觀(guān)察結果。出現紅色者為陽(yáng)性，出現黃色

者為陰性。大腸桿菌能分解蛋白質(zhì)中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質(zhì)(吲哚)，靛基質(zhì)與對二甲基氨基苯甲醛結合，形成玫瑰色靛基質(zhì)(紅色化合物),為陽(yáng)性結果。

賴(lài)氨酸脫酶試驗

   將被檢菌接種到賴(lài)氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對照生化管中，于36±1℃培養18h-24h后，觀(guān)察結果。

賴(lài)氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對照均變黃為陰性，賴(lài)氨酸脫羧酶肉湯變紫，氨基酸脫羧酶對照變黃為陽(yáng)性。

大腸桿菌賴(lài)氨酸試驗為陰性，沙門(mén)氏菌為陽(yáng)性。

細菌甲基紅(Methylred)試驗(該試驗簡(jiǎn)稱(chēng)MR試驗)  大腸桿菌等分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸再被分解，產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸等，使培養基的pH降低到4.2以下，這時(shí)若加甲基紅指示劑呈現紅色。因甲基紅指示劑變色范圍是pH4．4(紅色)～pH6.2(黃色)。產(chǎn)氣桿菌，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，但很快將丙酮酸脫羧，轉化成醇等物，則培養基的pH仍在6.2以上，故此時(shí)加入甲基紅指示劑，呈現黃色。

細菌VP試驗原理

細菌在葡萄糖代謝中生成丙酮酸，從丙酮酸開(kāi)始、隨細菌種類(lèi)不同而有多種分解途徑，有的使丙酮酸進(jìn)一步分解，生成甲酸、乙酸、乳酸、二氫和氧化碳等最終產(chǎn)物，有的可使丙酮酸脫羧變?yōu)橹行宰罱K產(chǎn)物乙酰甲基醇。在堿性條件下，可被空氣中氧氣氧化為丁二酮、丁二酮與蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用，生成紅色化合物，即V-P試驗陽(yáng)性。

試劑組成：A液：a-萘酚  B液：40%氫氧化鉀溶液

試驗時(shí)先加A液，再加B液，若加反可能會(huì )出現假陽(yáng)性。

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