固體和半固體樣品:稱(chēng)取25 g樣品至盛有225mL滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖,即為1:10稀釋液;蚍湃胧⒂225 mL無(wú)菌蒸餾水的均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器(不推薦使用刀片式均質(zhì)器)拍打2min,制成1:10的樣品勻液。
,制成1:10的樣品勻液。
液體樣品:取25mL樣品至盛有225 mL無(wú)菌蒸餾水的錐形瓶(可在瓶?jì)阮A臵適當數量的無(wú)菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。
取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無(wú)菌水的試管中, 另?yè)Q一支1mL無(wú)菌吸管反復吹吸,此液為1:100稀釋液。
樣品的稀釋不推薦使用刀片式均質(zhì)器
原標準為“反復吹吸50次”(原標準為“反復吹吸50次”)?墒褂娩鰷u混勻器?墒褂娩鰷u混勻器拍擊式均質(zhì)器
取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無(wú)菌水的試管中, 另?yè)Q一支1mL無(wú)菌吸管反復吹吸原標準為“反復吹吸5次”,此液為1:100稀釋液。
制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1 mL無(wú)菌吸管。5.1.5根據對樣品污染狀況的估計,選擇2個(gè)~3個(gè)(原標準為“3個(gè)”) (液體樣品可包括原液)在進(jìn)行10倍遞增稀釋的同時(shí),每個(gè)稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液于2個(gè)無(wú)菌平皿內。同時(shí)分別取1 mL稀釋液加入2個(gè)無(wú)菌平皿作空白對照。
及時(shí)將15mL~20 mL冷卻至46℃的馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養基(可放置46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉動(dòng)平皿使其混合均勻。
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