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    培養基制備方法-2015藥典--控制菌檢查



    錄入時(shí)間:2014-9-5 11:43:09 來(lái)源:海博生物

     

    1.胰酪大豆胨液體培養基(TSB)、胰酪大豆胨瓊脂培養基(TSA)、沙氏葡萄

    糖液體培養基(SDB) 照無(wú)菌檢查法(通則1101)制備。

    2、沙氏葡萄糖瓊脂培養基(SDA)

    照無(wú)菌檢查法(通則1101)制備。如使用含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂培養基,

    應確認培養基中所加的抗生素量不影響檢品中霉菌和酵母菌的生長(cháng)。

    3、 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA

    馬鈴薯(去皮) 200g           瓊脂 14.0g

    葡萄糖 20.0g                純化水 1000mL

    取馬鈴薯,切成小塊,加水1000mL,煮沸20-30min,用6-8 層紗布過(guò)濾,

    取濾液補水至1000ml,調節pH 值使滅菌后在25℃的pH 值為5.6±0.2,加入瓊

    ,加熱溶化后, 再加入葡萄糖,搖勻,分裝,滅菌。

    4.玫瑰紅鈉瓊脂培養基培養基

    5.0g         玫瑰紅鈉 0.0133g

    葡萄糖 10.0g    瓊脂 14.0g

    磷酸二氫鉀 1.0g 純化水 1000ml

    硫酸鎂 0.5g

    除葡萄糖、玫瑰紅鈉外,取上述成分,混合,微溫溶解,加入葡萄糖、玫瑰紅鈉,

    搖勻,分裝,滅菌。

    5、硫乙醇酸鹽流體培養基 照無(wú)菌檢查法(通則1101)制備

    6、腸道菌增菌液體培養基

    明膠胰酶水解物 10.0g      二水合磷酸氫二鈉 8.0g

    牛膽鹽 20.0g              亮綠 15mg

    葡萄糖 5.0g               純化水 1000mL

    磷酸二氫鉀 2.0g

    除葡萄糖、亮綠外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使加熱后在25

    pH 值為7.2±0.2,加入葡萄糖、亮綠,加熱至100 30 分鐘,立即冷卻。

    7、紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基

    酵母浸出粉 3.0g       中性紅 30mg

    明膠胰酶水解物 7.0g   結晶紫 2mg

    脫氧膽酸鈉 1.5g       瓊脂 15.0g

    葡萄糖 10.0g          純化水 1000mL

    氯化鈉 5.0g

    除葡萄糖、中性紅、結晶紫、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH

    使加熱后在25℃的pH 值為7.4±0.2。加入葡萄糖、中性紅、結晶紫、瓊脂,加

    熱煮沸(不能在高壓滅菌器中加熱)。

    8、麥康凱液體培養基

    明膠胰酶水解物 20.0g      溴甲酚紫 10mg

    乳糖 10.0g                純化水 1000mL

    牛膽鹽 5.0g

    除乳糖、溴甲酚紫外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅菌后在

    25℃的pH 值為7.3±0.2,加入乳糖、溴甲酚紫,分裝,滅菌。

    9、麥康凱瓊脂培養基

    明膠胰酶水解物 17.0g        中性紅 30.0mg

    胨(肉或酪蛋白) 3.0g       結晶紫 1mg

    乳糖 10.0g                  瓊脂 13.5g

    脫氧膽酸鈉 1.5g             純化水 1000mL

    氯化鈉 5.0g

    除乳糖、中性紅、結晶紫、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH

    值使滅菌后在25℃的pH 值為7.1±0.2,加入乳糖、中性紅、結晶紫、瓊脂,加

    熱煮沸1 分鐘,并不斷振搖,分裝,滅菌。

    10、RV 沙門(mén)菌增菌液體培養基

    大豆胨 4.5g       六水合氯化鎂 29.0g

    氯化鈉 8.0g       孔雀綠 36mg

    磷酸氫二鉀 0.4g   純化水 1000mL

    磷酸二氫鉀 0.6g

    除孔雀綠外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅菌后在25℃的

    pH 值為5.2±0.2。加入孔雀綠,分裝,滅菌,滅菌溫度不能超過(guò)115℃。

    11、木糖賴(lài)氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基

    酵母浸出粉 3.0g        氯化鈉 5.0g

    L-賴(lài)氨酸 5.0g          硫代硫酸鈉 6.8g

    木糖 3.5g              枸櫞酸鐵銨 0.8g

    乳糖 7.5g              酚紅 80mg

    蔗糖 7.5g              瓊脂 13.5g

    脫氧膽酸鈉 2.5g 純化水 1000mL

    除三種糖、酚紅、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使加熱

    后在25℃的pH 值為7.4±0.2,加入三種糖、酚紅、瓊脂,加熱至沸騰,冷至50

    傾注平皿(不能在高壓滅菌器中加熱)。

    12.三糖鐵瓊脂培養基(TSI

    20.0g             硫酸亞鐵 0.2g

    牛肉浸出粉 5.0g      硫代硫酸鈉 0.2g

    乳糖 10.0g           0.2%酚磺酞指示液 12.5ml

    蔗糖 10.0g           瓊脂 12.0g

    葡萄糖 1.0g          純化水 1000ml

    氯化鈉 5.0g

    除三種糖、0.2%酚磺酞指示液、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解, 調

    pH 值使滅菌后在25℃的pH 值為7.3±0.1,加入瓊脂,加熱溶化后,再加入

    其余各成分,搖勻,分裝,滅菌,制成高底層(23cm)短斜面。

    13、溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基

    明膠胰酶水解物 20.0g     甘油 10mL

    氯化鎂 1.4g              瓊脂 13.6g

    硫酸鉀 10.0g             溴化十六烷基三甲銨 0.3g

    純化水 1000mL

    除瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 使滅菌后在25℃的pH

    7.4±0.2,加入瓊脂,加熱煮沸1 分鐘,分裝,滅菌。

    14、甘露醇鹽瓊脂培養基

    胰酪胨 5.0g 氯化鈉 75.0g

    動(dòng)物組織胃蛋白酶水解物 5.0g  酚紅 25mg

    牛肉浸出粉 1.0g             瓊脂 15.0g

    D-甘露醇 10.0g              純化水 1000mL

    除甘露醇、酚紅、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅

    菌后在25℃的pH 值為7.4±0.2,加熱并振搖,加入甘露醇、酚紅、瓊脂,煮沸

    1 分鐘,分裝,滅菌。

    15、梭菌增菌培養基培養基

    10.0g          鹽酸半胱氨酸 0.5g

    牛肉浸出粉 10.0g  乙酸鈉 3.0g

    酵母浸出粉 3.0g   氯化鈉 5.0g

    可溶性淀粉 1.0g   瓊脂 0.5g

    葡萄糖 5.0g       純化水 1000mL

    除葡萄糖外,取上述成分,混合,加熱煮沸使溶解,并不斷攪拌。如需要,

    調節pH 值使滅菌后在25℃的pH 值為6.8±0.2。加入葡萄糖,混勻,分裝,滅

    菌。

    16、哥倫比亞瓊脂培養基

    胰酪胨 10.0g          玉米淀粉 1.0g

    肉胃蛋白酶消化物 5.0g 氯化鈉 5.0g

    心胰酶消化物 3.0g     瓊脂 10.015.0g(依凝固力)

    酵母浸出粉 5.0g       純化水 1000mL

    除瓊脂外,取上述成分,混合,加熱煮沸使溶解,并不斷攪拌。如需要,調

    pH 值使滅菌后在25℃的pH 值為7.3±0.2,加入瓊脂,加熱溶化,分裝,滅

    菌。如有必要,滅菌后,冷至4550℃加入相當于20mg 慶大霉素的無(wú)菌硫酸慶

    大霉素,混勻,傾注平皿。

    17. 念珠菌顯色培養基

    10.2g      瓊脂 15g

    氫罌素 0.5g   滅菌水 1000ml

    色素 22.0g

    除瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH 值使滅菌后在25℃的pH

    6.3±0.2。濾過(guò),加入瓊脂,加熱煮沸,不斷攪拌至瓊脂完全溶解,傾注平

    皿。

    SDA培養基用于白色念珠菌控制菌檢查;哥倫畢業(yè)用于梭菌控制菌檢查;甘露醇氯化鈉瓊脂培養基用于金葡菌控制菌檢查;于溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基用于銅綠假單胞菌的控制菌檢查;木糖賴(lài)氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基用于沙門(mén)氏菌控制菌檢查;麥康凱瓊脂培養基用于大腸埃希菌控制菌檢查;胰酪大豆胨液體用于稀釋?zhuān)蝗糇霞t膽鹽葡萄糖瓊脂培養基用于耐膽鹽革蘭陰性菌的控制菌檢查。

     

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