液體培養基的定量測定方法
選擇質(zhì)控菌株和參考培養基
目標菌:用少量目標菌的培養物(10-100CFU),接種測試肉湯和參考肉湯,混勻
非目標菌:用大量非目標菌培養物(大于1000CFU)接種測試肉湯和參考肉湯,混勻
在適宜條件下培養一定時(shí)間
從每一種肉湯中移取一定量的菌液(必要時(shí)可取原菌液的稀釋液)涂布于非選擇性瓊脂平板上
培養后,對目標菌和非目標菌分別進(jìn)行計數,并根據不同的測試目的進(jìn)行計算和解釋
液體培養基的定量測定方法
——評價(jià):
目標菌的PR不應小于0.1(即測試培養基和參考培養基菌落總數的差別不超過(guò)一個(gè)數量級)
非目標菌的SF值至少應達到2液體培養基的半定量測定方法
混合菌的接種:在測試肉湯中接種10CFU-100CFU的目標菌和>1000CFU的非目標菌,混勻
非目標菌的接種:在測試肉湯中接種>1000CFU的非目標菌,混勻
在規定的時(shí)間和溫度下進(jìn)行培養
用3mm接種環(huán)取一環(huán)混合菌培養液劃線(xiàn)接種到特定目標菌選擇性平板上,取一環(huán)非目標菌培養液劃線(xiàn)接種到非選擇性平板上
將兩種平板在規定條件下培養
結果判定:選擇性平板上有至少10個(gè)目標菌生長(cháng),表示測試肉湯的生長(cháng)率良好;非選擇性平板上沒(méi)有菌生長(cháng)或少于10個(gè)菌,則表示測試肉湯的選擇性良好
液體培養基的半定量測定方法
混合菌的接種:在測試肉湯中接種10CFU-100CFU的目標菌和>1000CFU的非目標菌,混勻
非目標菌的接種:在測試肉湯中接種>1000CFU的非目標菌,混勻
在規定的時(shí)間和溫度下進(jìn)行培養
用3mm接種環(huán)取一環(huán)混合菌培養液劃線(xiàn)接種到特定目標菌選擇性平板上,取一環(huán)非目標菌培養液劃線(xiàn)接種到非選擇性平板上
將兩種平板在規定條件下培養
結果判定:選擇性平板上有至少10個(gè)目標菌生長(cháng),表示測試肉湯的生長(cháng)率良好;非選擇性平板上沒(méi)有菌生長(cháng)或少于10個(gè)菌,則表示測試肉湯的選擇性良好
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