初發(fā)酵實(shí)驗
對每個(gè)樣品,選擇適宜的三個(gè)連續稀釋度的樣品勻液,液體樣品可以包括未經(jīng)稀釋的原液,每個(gè)稀釋度接種三管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯,每管接種1mL(如接種量需要超過(guò)1mL,則用雙料LST肉湯)。36℃±1℃培養24h±2h,檢查倒管內是否有氣泡產(chǎn)生或輕搖試管時(shí)是否有密集連續的細小氣泡從管底逸出,如未產(chǎn)氣則繼續培養至48h±2h。記錄在24h和48h內產(chǎn)氣的LST肉湯管數。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性;對產(chǎn)氣者,則進(jìn)行復發(fā)酵試驗。
復發(fā)酵實(shí)驗
用直徑為3mm的接種環(huán)從所有48h±2h內發(fā)酵產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養物1環(huán),移種于煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯管中,置36℃±1℃溫箱內,培養48h±2h,觀(guān)察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者,計為大腸菌群陽(yáng)性管。
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